蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：基質金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)

MME; HME; ME; Macrophage Metalloelastase; Macrophage Elastase

型號：GOY-01D186

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質

預測分子量：22.6kDa

實際分子量：23kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ala294~Cys473 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：9.3

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Galactose-1-Phosphate Uridylyltransferase (GALT)  產品名稱：半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉移酶(GALT)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

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英文名稱：Recombinant Eosinophil Peroxidase (EPX)  產品名稱：嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPX)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

C2CD3蛋白抗體 C2CD3

22號染色體開放閱讀框43抗體 C22orf43

半胱胺酸蛋白14抗體 Caspase 14

3號染色體開放閱讀框55抗體 C3orf55

3號染色體開放閱讀框65抗體 C3orf65

3號染色體開放閱讀框14抗體 C3orf14

3號染色體開放閱讀框20抗體 C3orf20

3號染色體開放閱讀框23抗體 C3orf23

3號染色體開放閱讀框32抗體 C3orf32

3號染色體開放閱讀框36抗體 C3orf36

3號染色體開放閱讀框31抗體 C3ORF31

3號染色體開放閱讀框38抗體 C3orf38

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釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

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Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)規(guī)格：

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SW1116(人結腸腺細胞)斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri

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嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis

黃孢平革菌

小鼠前脂肪細胞培養(yǎng)基100mL

HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2