蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

EL; EDL; Endothelial Lipase; Endothelial cell-derived lipase

型號(hào)：GOY-01D210

酶與激酶

代謝通路

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Secreted

預(yù)測(cè)分子量：34.6kDa

實(shí)際分子量：33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Gly203~Lys471 (Accession # Q8VBX1) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：9.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Procollagen C Proteinase Enhancer 2 (PCPE2)  產(chǎn)品名稱：前膠原C端增強(qiáng)子2(PCPE2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 5 (PRDX5)  產(chǎn)品名稱：過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Corin (CRN)  產(chǎn)品名稱：Corin蛋白(CRN)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant D-Aspartate Oxidase (DDO)  產(chǎn)品名稱：D-天冬氧化酶(DDO)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Acetylcholinesterase (ACHE)  產(chǎn)品名稱：乙酰酯酶(ACHE)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 1 (CDK1)  產(chǎn)品名稱：周期素依賴性激酶1(CDK1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白107抗體 CCDC107

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體 CCDC129

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體 CCDC18

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白56抗體 CCDC56

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白116抗體 CCDC116

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白117抗體 CCDC117

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體 CCDC127

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138抗體 CCDC138

轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體 Cux2

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146抗體 CCDC146

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144NL抗體 CCDC144NL

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體 CCDC147

內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白大鼠斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

L-Glutamine大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusMN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae微桿菌屬 Microbacterium sp.

猴菌 Hericium erinaceusImproved-Lowry蛋白定量試劑盒

總狀共霉 Syncephalastrum racemosum大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基

青色小四孢菌生孢梭菌 Clostridium sporogenes

人羊膜細(xì)胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基SW-13(人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞)

桿菌屬 Lactobacillus sp.釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

刺孢小殼銀漢霉 Cunninghamella echinuata大鼠卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

人食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基B16-F1(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)

洋蔥假單胞菌 Pseudomonas cepacia釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae