產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Leucine Aminopeptidase (LAP)

LAPEP, LAP3; PEPS; Peptidase S; Leucyl Aminopeptidase; Cytosol aminopeptidase; Proline aminopeptidase; Prolyl aminopeptidase

型號(hào)：GOY-01D215

酶與激酶

代謝通路

發(fā)育科學(xué)

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：35.1kDa

實(shí)際分子量：35.1kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Pro206~Arg496 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant High Molecular Weight Kininogen (HMWK)  產(chǎn)品名稱：高分子量激肽原(HMWK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Heparanase (HPSE)  產(chǎn)品名稱：肝素酶(HPSE)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant RNA Exonuclease 2 Homolog (REXO2)  產(chǎn)品名稱：RNA核酸外切酶2同源物(REXO2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1 (RXFP1)  產(chǎn)品名稱：松弛素/胰島素樣肽受體1(RXFP1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 1 (GSTM1)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶μ1(GSTM1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體 C11orf53

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體 C11orf24

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體 C11orf57

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體 C11orf65

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框71抗體 C11orf71

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體 C11orf74

12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體 C12ORF4

12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體 C12ORF24

CD30抗體 CD153

細(xì)胞角蛋白19，17，14，42，10抗體 Cytokeratin 10+14+17+19+42

環(huán)核苷酸門控陽(yáng)離子通道蛋白CNG-1β抗體 CNGB1

細(xì)胞角蛋白10抗體 CK10/Cytokeratin 10

亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白大鼠藍(lán)微褐鏈霉菌 Streptomyces cyaneofuscatus黃直絲鏈霉菌 Streptomyces flavorectus

小鼠骨髓瘤細(xì)胞小鼠成纖維細(xì)胞

酒假絲酵母 Candida kefyrA2780(人卵巢細(xì)胞)

人淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基植物桿菌 Lactobacillus plantarum

絲蓋小苞腳菇 Volvariella bombycina脈孢菌 Neurospora sp.

溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus6-10B, 人鼻咽細(xì)胞系

卵巢釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)球孢白僵菌 Beauveria bassiana

尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectummyc標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)

大鼠腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基日本根霉 Rhizopus japonicus

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia異型德克酵母 Dekkera anomala

挪威假絲酵母 Candida norvegensis小鼠真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

MDA-MB-468(人腺細(xì)胞)運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis