蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase

型號(hào)：GOY-01D221

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

肝膽病學(xué)

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測分子量：19.6kDa

實(shí)際分子量：20kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser225~Asp390 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產(chǎn)品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Neprilysin (CD10)  產(chǎn)品名稱：腦啡肽酶(CD10)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 12 (ADAMTS12)  產(chǎn)品名稱：血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶12(ADAMTS12)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)  產(chǎn)品名稱：耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 5 (ADAM5)  產(chǎn)品名稱：解整合素金屬5(ADAM5)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Lysozyme (LZM)  產(chǎn)品名稱：(LZM)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340)

趨化因子受體1抗體 CX3CR1

磷酸化致癌基因C-Myc抗體 phospho C-Myc(Thr58/pSer62)

CD33抗體 CD33

磷酸化原癌基因c-kit抗體 phospho-c-kit(Tyr936)

磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Thr91+Thr93)

氯離子通道蛋白3抗體 CLCN3

磷酸化周期素E抗體 phospho-Cyclin E (Thr395)

磷酸化周期素依賴性激酶9抗體 Phospho-CDK9 (Thr186)

磷酸化Connexin 43蛋白抗體 Phospho-Connexin 43 (Ser368)

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 Phospho-cdc25C (Ser216)

絲切蛋白抗體 cofilin

基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白小鼠小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基蛹蟲草(北冬蟲夏草，北蟲草) Cordyceps militaris

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes尖頂羊肚菌 Morchella conica

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus

人皮膚成纖維樣細(xì)胞人卵巢細(xì)胞

HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum牛鏈球菌 Streptococcus bovis

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae金橫裂鏈霉菌 Streptomyces aureosegmentosus

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桿菌屬 Lactobacillus sp.燼灰鏈霉菌 Streptomyces cinereogriseus

U14(小鼠子宮頸細(xì)胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.FLAG標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)

低分化鼻咽細(xì)胞屬 Serratia sp.

異常漢遜酵母 Hansenula anomala磚紅鐮孢