蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：磷脂酶A2激活蛋白(PLAP)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2 Activating Protein (PLAP)

PLAA; PLA2P; PLA2-P; DOA1

型號(hào)：GOY-01D229

酶與激酶

代謝通路

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：18.1kDa

實(shí)際分子量：22kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Glu162~Ala312 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：4.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 3 (PRDX3)  產(chǎn)品名稱：過(guò)氧化還原酶3(PRDX3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)  產(chǎn)品名稱：酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)  產(chǎn)品名稱：半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產(chǎn)品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產(chǎn)品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Ovis aries; Ovine (Sheep，綿羊)

英文名稱：Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)  產(chǎn)品名稱：肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(N端) CRIPTO

CD59抗體 CD59

鈣激活14抗體 Calpain 14

細(xì)胞角蛋白18抗體（C端） CK18

7型膠原抗體 Collagen VII

磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 Phospho-Beta Catenin (Thr41 + Ser45)

原癌蛋白CBL2抗體 CBL2

信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α抗體 SIRP Alpha

巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體 CCL16

果蠅CG6856-PA抗體 CG6856-PA

信號(hào)淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體 CD150

氧化酶COX7A2抗體 COX7A2

磷脂酶A2激活蛋白(PLAP)重組蛋白人人輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基COLO 320DM(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)

泡盛曲霉 Aspergillus awamori釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

非洲爪蟾胚胎細(xì)胞植物桿菌 Lactobacillus plantarum

涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli

MS751(人子宮頸表皮細(xì)胞)結(jié)晶紫染色液

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisCaki-1, 人腎透細(xì)胞皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞

酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris總狀毛霉 Mucor racemosus

鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

人肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基嗜鞣管囊酵母 Pachysolen tannophilus

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

胰凝(含100mL酶解緩沖液)Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

植物桿菌 Lactobacillus plantarum粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe