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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-02 16:53:05瀏覽次數(shù):230次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D235 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2) |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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英文名稱:Recombinant Salt Inducible Kinase 2 (SIK2) 產(chǎn)品名稱:鹽誘導(dǎo)激酶2(SIK2)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D235 |
產(chǎn)品名稱:M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠
英文名稱:Recombinant Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)
M2PK; PKM; M2-PK; PKM1; CTHBP; OIP3; PK3; PKM; TCB; THBP1; Pyruvate kinase muscle isozyme; Thyroid hormone-binding protein 1; Cytosolic thyroid hormone-binding protein; Pyruvate Kinase, Muscle
型號(hào):GOY-01D235
酶與激酶
腫瘤免疫
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::Cytoplasm. Nucleus
預(yù)測(cè)分子量:26.4kDa
實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Val324~Pro531 (Accession # P11980) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):9.0
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
1號(hào)染色體開放閱讀框177抗體 C1orf177
1號(hào)染色體開放閱讀框174抗體 C1orf174
1號(hào)染色體開放閱讀框180抗體 C1orf180
1號(hào)染色體開放閱讀框182抗體 C1orf182
1號(hào)染色體開放閱讀框183抗體 C1orf183
1號(hào)染色體開放閱讀框187抗體 C1orf187
1號(hào)染色體開放閱讀框189抗體 C1orf189
1號(hào)染色體開放閱讀框190抗體 C1ORF190
1號(hào)染色體開放閱讀框194抗體 C1orf194
1號(hào)染色體開放閱讀框198抗體 C1orf198
1號(hào)染色體開放閱讀框192抗體 C1orf192
1號(hào)染色體開放閱讀框21抗體 C1orf21
M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠土曲霉 Aspergillus terreus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞)BSC-1(猴腎細(xì)胞)
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
屎腸球菌 Enterococcus faecium酒假絲酵母 Candida kefyr
德巴利酵母 Debaryomyces occidentalis地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)THP-1人單核白血病細(xì)胞
赭曲霉 Aspergillus ochraceus直絲淡紫灰鏈霉菌 Streptomyces lavendularectus
大鼠肝細(xì)胞NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系
紫紅曲霉 Monascus purpureus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)異常漢遜酵母 Hansenula anomala
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
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