產品屬性：

產品名稱：糖原合酶激酶3α(GSK3a)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

Serine/threonine-protein kinase GSK3A

型號：GOY-01D240

信號轉導

酶與激酶

代謝通路

內分泌學

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：37.4kDa

實際分子量：38kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ile122~Asn416 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：9.0

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

內臟移位線管蛋白CFC1蛋白抗體 CFC1

Cezanne蛋白抗體 Cezanne

補體因子H相關蛋白2抗體 CFHL2

補體因子H相關蛋白4抗體 CFHL4

補體因子H相關蛋白5抗體 CFHL5

7號染色體開放閱讀框28A抗體 CG028/C7orf28A

CpG結合蛋白抗體 CGBP

CGG結合蛋白1抗體 CGGBP1

結蛋白樣蛋白CGNL1抗體 CGNL1

細胞生長調節(jié)蛋白CGREF1抗體 CGREF1

cGMP依賴性蛋白激酶2抗體 CGK2

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泡盛曲霉 Aspergillus awamori地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

L-O2(人正常肝細胞)球孢白僵菌 Beauveria bassiana

亞側耳 Hohenbuehelia serotina三七根腐病菌 Fusarium solani

SPC-A-1(人肺細胞)HHCC(人肝細胞)

香菇屬 Lentinula sp.根瘤菌

SW620(人結腸細胞)蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

松口蘑 Tricholoma matsutake宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis核側耳 Pleurotus tuber-regium

藍色預染中分子量蛋白Marker費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

柄木霉人腺上皮細胞培養(yǎng)基