蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)

NOS; nNOS; IHPS1; NC-NOS; N-NOS; bNOS; Neuronal NOS; Constitutive NOS; NOS type I; Nitric Ocide Synthase; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase NOS1

型號(hào)：GOY-01D337

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學(xué)

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：14.9kDa

實(shí)際分子量：16kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Gln9~Ser136 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：7.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Carboxypeptidase B1, Tissue (CPB1)  產(chǎn)品名稱：羧肽酶B1(CPB1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant 15-Lipoxygenase-2 (15-LO-2)  產(chǎn)品名稱：花生四烯酸-15-脂加氧酶B(15-LO-2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Tyrosine 3/Tryptophan 5 Monooxygenase Activation Protein Theta (YWHAq)  產(chǎn)品名稱：3/色5單加氧酶活化蛋白θ(YWHAq)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人), Mus musculus (Mouse，小鼠), Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Furin (FUR)  產(chǎn)品名稱：弗林(FUR)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 3 (PSMC3)  產(chǎn)品名稱：ATP酶體26S亞基3(PSMC3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 2 (PSMC2)  產(chǎn)品名稱：ATP酶體26S亞基2(PSMC2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框152抗體 C9orf152

X染色體開(kāi)放閱讀框56抗體 CXorf56

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體 C6orf58

接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體 CNTNAP4

CD24抗體 CD24

接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體 CNTNAP3

CD24抗體 CD24

限局性核因子3抗體 NLF3

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框150抗體 C9orf150

鈣粘附蛋白9抗體 Cadherin 9

胰羧肽酶A6抗體 CPA6

鈣粘蛋白15抗體 FAT3

神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白大鼠膠原酶(含100mL酶解緩沖液)大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

菌核核盤(pán)菌神農(nóng)架青霉 Penicillium shennongjianum

NCI-H446(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)土星漢遜酵母 Hansenula saturnus

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)基

雙孢蘑菇rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞

球毛殼 Chaetomium globosum萎芽孢桿菌 Bacillus atrophaeus

平菇 Pleurotus sp.釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

萎芽孢桿菌 Bacillus atrophaeus地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

香菇 Lentinula edodes雙孢蘑菇

植物桿菌 Lactobacillus plantarum大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumSUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae