蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase I (CA1)

CA-I; CAI; Car1; CAB; Carbonic anhydrase B; Carbonate dehydratase I

型號(hào)：GOY-01D362

酶與激酶

骨骼代謝

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì), 染色體

預(yù)測(cè)分子量：24.1kDa

實(shí)際分子量：24kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Asp15~Gln223 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：6.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Ribonuclease A9 (RNASE9)  產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶A9(RNASE9)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)  產(chǎn)品名稱：肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Beta-1,3-N-Acetylglucosaminyltransferase Manic Fringe (MFNG)  產(chǎn)品名稱：β-1,3-N-乙酰葡糖胺基轉(zhuǎn)移酶Manic Fringe(MFNG)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase A (LDHA)  產(chǎn)品名稱：乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

英文名稱：Recombinant Beta-1,3-N-Acetylglucosaminyltransferase Manic Fringe (MFNG)  產(chǎn)品名稱：β-1,3-N-乙酰葡糖胺基轉(zhuǎn)移酶Manic Fringe(MFNG)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)  產(chǎn)品名稱：谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

二氫嘧啶抗體 Dihydropyrimidinase

DYDC1蛋白抗體 DYDC1

脫磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 DCAKD

DCST1蛋白抗體 DCST1

DCUN1D4蛋白抗體 DCUN1D4

脫氧輔合酶蛋白抗體 DHPS

短鏈脫氫酶/還原酶家族4樣2蛋白抗體 DHRS4L2

DDRGK1蛋白抗體 DDRGK1

DENND1B蛋白抗體 DENND1B

DEPTOR蛋白抗體 DEPTOR

DENND2A蛋白抗體 DENND2A

耳聾常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白1抗體 DIAPH1

碳酸酐酶Ⅰ(CA1)重組蛋白小鼠許旺酵母 Schwanniomyces occidentalisBC-009(人腺細(xì)胞)

人大腸細(xì)胞HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

CAL-27(人舌鱗細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蠟蚧輪枝菌 Verticillum lecanii好食脈孢菌

無(wú)丙二酸檸檬酸桿菌 Citrobacter amalonaticus小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumHCT-15(人結(jié)腸細(xì)胞)

人心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基BT-549(人腺管細(xì)胞)

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis酒假絲酵母 Candida kefyr

雞胚成纖維細(xì)胞地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

雪白根霉厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePANC-1, 人胰腺細(xì)胞