蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Caspase 4 (CASP4)

ICE(rel)II; ICH2; TX; Protease ICH-2; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 4; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase

型號(hào)：GOY-01D515

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：22.4kDa

實(shí)際分子量：24kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Asn78~Glu265 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Flap Structure Specific Endonuclease 1 (FEN1)  產(chǎn)品名稱：皮瓣結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶(FEN1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Plasmin/Antiplasmin Complex (PAP)  產(chǎn)品名稱：纖溶酶/抗纖溶酶復(fù)合體(PAP)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Fatty Acid Synthase (FASN)  產(chǎn)品名稱：脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白物種：Danio rerio (Zebrafish，斑馬魚(yú))

英文名稱：Recombinant Enterokinase (ENTK)  產(chǎn)品名稱：腸激酶(ENTK)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP)  產(chǎn)品名稱：堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Obg Like ATPase 1 (OLA1)  產(chǎn)品名稱：Obg樣ATP酶1(OLA1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 phospho-Filamin A(Ser2522)

磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 phospho-Filamin A (Ser2151)

DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體 FANCG

磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 phospho-FLNA (Tyr1046)

磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體 phospho-FXYD1 (Ser83)

磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463)

磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體 phospho-FXYD1 (Ser88)

叉頭蛋白N1抗體 FOXN1

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1抗體 FNDC1

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體 FNDC8

磷酸化DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體 phospho-FANCG (Ser383)

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體 FNDC3B

胱天蛋白酶4(CASP4)重組蛋白人髓鞘型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP8)重組蛋白英文名稱：Recombinant Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin (FABP8)

大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

WI-38(人胚肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)重組蛋白英文名稱：Recombinant GATA Binding Protein 4 (GATA4)

雙歧桿菌BS培養(yǎng)基/BS Medium用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1)

胰胨大豆胨固綠/胰蛋白胨大豆快綠/胰蛋白胨大豆固綠/Tryptic Soy Fast Green Agar濾膜細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

胚抗原(CEA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carcinoembryonic Antigen (CEA)