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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-08 12:57:52瀏覽次數(shù):241次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D611 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (AS |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬15(MMP15)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)
產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬15(MMP15)重組蛋白 物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬) 英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)
產(chǎn)品名稱:多功能肽酶2(PSMB9)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Proteasome subunit beta type-9 (PSMB9)
產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Bγ(PKBg)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Protein Kinase B Gamma (PKBg)
產(chǎn)品名稱:脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D611 |
英文名稱:Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (ASAH1)
AC; ASAH; PHP; PHP32; Acid Ceramidase; Acylsphingosine deacylase; Putative 32 kDa heart protein
型號(hào):GOY-01D611
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::溶酶體
預(yù)測(cè)分子量:32.7kDa
實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Thr144~Trp395 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):7.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
組蛋白去乙?;?/span>9抗體 HDAC9
短鏈L-3羥烷基脫氫酶抗體 SCHAD
組蛋白去乙酰化酶10抗體 HDAC10
HOXB4抗體 HOXB4
磷酸化HER2受體抗體 Phospho-HER2(Tyr1248)
組蛋白去乙?;?/span>6抗體 HDAC6
磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體 phospho-HDAC6 (Ser22)
組蛋白去乙?;?/span>7抗體 HDAC7
組蛋白去乙?;?/span>8抗體 HDAC8
磷酸化HER4抗體 Phospho-HER4 (Tyr984)
磷酸化組蛋白去乙酰化酶7抗體 phospho-HDAC7 (Ser358)
組tRNA連接酶抗體 HARS
N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH1)重組蛋白人QG-56(人肺扁平上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
麥芽汁培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于酵母菌的增菌培養(yǎng)
NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
ⅩⅢA1肽(F13A1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1)
抗生素Ⅴ號(hào)培養(yǎng)基/抗生素5號(hào)培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.5抗生素微生物的效價(jià)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
甲狀旁腺素受體2(PTHR2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2)
葡萄球菌增菌肉湯/Staphylococcus Enrichment Broth凝固酶陽(yáng)生葡萄球菌選擇性增菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
肝細(xì)胞相關(guān)蛋白1(HCRP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hepatocellular Carcinoma Related Protein 1 (HCRP1)
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