蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial (CA5B)

CA-VB; CAVB; Carbonate dehydratase VB

型號(hào)：GOY-01D694

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Mitochondrion

預(yù)測(cè)分子量：36.4kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Cys34~Pro317 (Accession # Q9Y2D0) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱(chēng)：周期素依賴(lài)性激酶7(CDK7)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 7 (CDK7)

產(chǎn)品名稱(chēng)：血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

產(chǎn)品名稱(chēng)：血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱(chēng)：Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)

產(chǎn)品名稱(chēng)：周期素依賴(lài)性激酶1(CDK1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 1 (CDK1)

產(chǎn)品名稱(chēng)：周期素依賴(lài)性激酶2(CDK2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

白介素15抗體 IL-15

整合素α4抗體 Integrin alpha 4/CD49d/Integrin α4

磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 Phospho-IRAK1 (Thr209)

一氧化氮合成酶-2抗體（誘導(dǎo)型） iNOS

干擾素α6抗體 Interferon alpha 6

整合素β2/Integrin β2抗體 CD18

抑制素A/Inhibin βA抗體 Inhibin beta A

胰島素受體底物-3抗體 IRS-3

胰島素受體底物-1抗體 IRS1

胰島素受體底物-2抗體 IRS-2

胰島素受體底物p53蛋白抗體 BAIAP2

胰島素受體底物-4抗體 IRS-4

碳酸酐酶ⅤB(CA5B)重組蛋白人R2A/R2A Agar/R-2A Agar飲用水中導(dǎo)生細(xì)菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

CW-2(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)

葡萄糖斜面/Arginine Dextrose Agar霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

CT26.WT(小鼠結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：MLTC-1

趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2)

大鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

人成骨肉瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：MG-63

骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)