蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant D-Dopachrome Tautomerase (DDT)

DDCT; D-Dopachrome Decarboxylase; Phenylpyruvate tautomerase II

型號：GOY-01D742

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：13.8kDa

實際分子量：14kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Pro2~Leu118 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：對氧磷酶2(PON2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Paraoxonase 2 (PON2)

產(chǎn)品名稱：對氧磷酶3(PON3)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Paraoxonase 3 (PON3)

產(chǎn)品名稱：蔗糖酶異麥芽糖酶(SI)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Sucrase Isomaltase (SI)

產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶A8(RNASE8)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Ribonuclease A8 (RNASE8)

產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶A6(RNASE6)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Ribonuclease A6 (RNASE6)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細胞周期基因1蛋白抗體 KAT4

磷酸化離子通道蛋白Kv3.1抗體 phospho-KCNC1(Ser503)

驅(qū)動蛋白KIF5B抗體 KLF5

kelch樣蛋白13抗體 KLHL13

鈣激活鉀通道蛋白3抗體 KCNN3

腎臟和腦蛋白抗體 KIBRA

有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2B抗體 KIF2B

kelch樣蛋白9抗體 KLHL9

著絲點關(guān)聯(lián)蛋白1抗體 KNTC1

kelch樣蛋白5抗體 KLHDC5

驅(qū)動蛋白家族成員15抗體 KIF15

驅(qū)動蛋白家族成員C1抗體 KIFC1

D-多巴色素變位酶(DDT)重組蛋白人細胞周期素D1(CCND1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cyclin D1 (CCND1)

標準胎牛血清/Fetal bovine serum(Characterized FBS)BR200毫升國產(chǎn)/進口

神經(jīng)激肽B(NKB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Neurokinin B (NKB)

人支氣管成纖維細胞培養(yǎng)基100mL

SW 1353(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

半糖凝集素4(GAL4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Galectin 4 (GAL4)

腦—心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基 規(guī)格： 100g 用途： 廣泛用于霉菌、酵母、細菌的培養(yǎng)，括營養(yǎng)要求較高的微生物的培養(yǎng)，特別用于飲用天然礦泉水和城...

人腦膠質(zhì)瘤細胞英文名稱：HS683

胰蛋白胨大豆 規(guī)格： 250g 用途： 可廣泛應(yīng)用于細菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟...

全胃浸粉BR250克國產(chǎn)/進口

野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)重組蛋白英文名稱：Recombinant Agouti Related Protein (AGRP)