蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)

DCDC3A; DCLK; DCAMKL1; Doublecortin And CaM Kinase-Like 1; Doublecortin domain-containing protein 3A; Doublecortin-like and CAM kinase-like 1

型號(hào)：GOY-01D803

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：32.7kDa

實(shí)際分子量：30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Tyr390~Val647 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)

產(chǎn)品名稱：DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant DNA Methyltransferase 3B (DNMT3B)

產(chǎn)品名稱：二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH)

產(chǎn)品名稱：二酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移酶同源物2(DGAT2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 2 (DGAT2)

產(chǎn)品名稱：二酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移酶同源物1(DGAT1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 1 (DGAT1)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

腸道分化干細(xì)胞MATH-1蛋白抗體 MATH1

蛋白激酶C底物Marcks抗體 MARCKS

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體 Phospho-MKK7 (Ser271 + Thr275)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體 Phospho-MEK6 (Ser202)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Phospho-MEK4 (Ser80)

單克隆抗體 Methamphetamine(4D2)

線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 Mitoferrin 1

磷酸化原癌基因c-Met抗體 phospho Met (Tyr1365)

甘露聚糖結(jié)合凝集素肽酶1抗體 MASP

胃動(dòng)素受體抗體 MTLR

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 phospho-MEK1 (Ser298)

睪特異性MLT5蛋白抗體 MLT5

雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白人D-(+)-Melezitose Hydrate D-（+）松三糖10g瓶

8-Methoxypsoralen 花椒毒素298-81-720mg

盧戈碘液(革蘭氏染色)500ml瓶

Daidzin 大豆苷552-66-920mg

Albumin Human 人血清白蛋白1g瓶

5%BSA封閉液10ml瓶

N-Hydroxysulfosuccinimide sodium salt N-羥基琥珀酰亞胺磺酸鈉鹽1g瓶

Hanks(含鈣鎂,含酚紅)500ml瓶

Gibberellic Acid(GA3) 赤 (進(jìn)口)250mg支

Isopentenyl-adenosie異戊烯基腺嘌呤核苷(IPA)10mg瓶

Estriol 雌三醇50-27-1100mg

Marker I DNA ladder100T支

透析袋 扁寬18 截留分子量50000.5m/即用型管