蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)

酶與激酶

型號(hào)：GOY-01D955

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量：25.6kDa

實(shí)際分子量：26kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Gly52~Pro271 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：5.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cε(PKCe)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Epsilon (PKCe)

產(chǎn)品名稱：神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)重組蛋白  物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)  英文名稱：Recombinant Enolase, Neuron Specific (NSE)

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬9(MMP9)重組蛋白  物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)  英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬9(MMP9)重組蛋白  物種：Equus caballus; Equine (Horse，馬)  英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

產(chǎn)品名稱：銅伴侶超氧化物歧化酶重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase Copper Chaperone

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

多型性腺瘤基因1蛋白抗體 PLAG1

磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 Phospho-Paxillin(Ser83)

撲克蒙蛋白抗體 Pokemon/ZBTB7

CASP抗體 Protein CASP

/激酶蛋白PIM1+PIM3抗體 PIM1+PIM3

胞漿蛋白PACSIN3抗體 PACSIN3

跨膜接頭蛋白PAG抗體 PAG1

PARD6G蛋白抗體 PARD6G

磷酸肌醇3激酶接頭蛋白1抗體 PIK3AP1

PRAM1蛋白抗體 PRAM1

胎盤蛋白6抗體 PL6

廣譜細(xì)胞角蛋白PCK抗體 Pan Cytokeratin/p-CK

兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白人小鼠腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

革蘭氏染液(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)/Gram Stain Solution(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)細(xì)菌革蘭氏染色50毫升×4國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

發(fā)酵培養(yǎng)基/Mannitol Ferment Medium腸道桿菌的鑒別，細(xì)菌發(fā)酵試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人成骨肉瘤細(xì)胞英文名稱：MG-63

Acc-2(人涎腺腺樣囊性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

抗體稀釋液(普通型)50ml瓶

Guar gum 瓜爾豆膠100g瓶

Bcap-37(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)重組蛋白英文名稱：Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)

層粘連蛋白受體1(LAMR1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Laminin Receptor 1 (LAMR1)

小鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

RQ1 Rnase-Free Dnase1000u支

透析袋MD34 ( 3500 D )5M卷