蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Heparanase (HPSE)

HPA; HPR1; HPSE1; HSE1; Endo-glucoronidase;

型號(hào)：GOY-01D1169

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Lysosome membrane; Peripheral membrane protein. Secreted. Nucle

預(yù)測(cè)分子量：20.9kDa

實(shí)際分子量：20.87kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Arg40~Pro188 (Accession # Q71RP1) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：8.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：羧酸酯酶1(CES1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Carboxylesterase 1 (CES1)

產(chǎn)品名稱：核酸外切酶1(EXO1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Exonuclease 1 (EXO1)

產(chǎn)品名稱：核酸外切酶1(EXO1)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Exonuclease 1 (EXO1)

產(chǎn)品名稱：巖藻糖-1-磷酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶(FPGT)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Fucose-1-Phosphate Guanylyltransferase (FPGT)

產(chǎn)品名稱：前列腺特異性膜抗原(PMSA)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Prostate-specific Membrane Antigen (PMSA)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體 S100A7

晶狀體發(fā)育相關(guān)蛋白Six3抗體 Six3

沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 SIRT1

S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體 S100A7

淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞受體1抗體 stabilin1

精鞭毛蛋白2抗體 Sperm Flagellar 2

跨膜蛋白SEMA5A抗體 Semaphorin 5A

IQCJ抗體 SCHIP1

2型豬鏈球菌溶血素抗體 streptococcus suis Suilysin

肺表面活性蛋白A抗體 SP-A

SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體 SHC3

肺表面活性蛋白A抗體 SP-A

肝素酶(HPSE)重組蛋白大鼠趨化因子C-X3-C-基元配體1(CX3CL1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)

血管生成素4(ANGPT4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Angiopoietin 4 (ANGPT4)

COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

骨成型蛋白2(BMP2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)

科瑪嘉李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 規(guī)格： 1000ml/瓶 用途：

YEB Agrobacterium Growth MediumBR100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞英文名稱：MAO

SKIRROW氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/空腸彎菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Skirrow Medium Base用于空腸彎菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

3% NaC1發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

TSN/胰蛋白胨亞鹽新/胰酪胨亞鹽新/亞鹽新/TSN Agar用于梭菌的檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

豬腎細(xì)胞英文名稱：PK（15）

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×2

甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)