蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 5 (ADAM5)

tMDCII; TMDC2; Putative transmembrane metalloproteinase-like, disintegrin-like, and cysteine-rich protein II; Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 5

型號(hào)：GOY-01D1247

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：28.4kDa

實(shí)際分子量：30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Cys413~Gln649 (Accession # Q5BK84) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：葡萄糖磷酸變位酶3(PGM3)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Phosphoglucomutase 3 (PGM3)

產(chǎn)品名稱：葡萄糖磷酸變位酶3(PGM3)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Phosphoglucomutase 3 (PGM3)

產(chǎn)品名稱：木糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ(XYLT1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Xylosyltransferase I (XYLT1)

產(chǎn)品名稱：泛素特異性肽酶2(USP2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Ubiquitin Specific Peptidase 2 (USP2)

產(chǎn)品名稱：泛素特異性肽酶2(USP2)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Ubiquitin Specific Peptidase 2 (USP2)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體 TEM8

熱休克蛋白75抗體 TRAP1

四分子交聯(lián)體15抗體（四旋蛋白） TSPAN15

腱調(diào)蛋白抗體（軟骨調(diào)節(jié)素樣1蛋白） TNMD

血栓素A2受體抗體 TXA2R

Toll樣受體11抗體 TLR11

血小板反應(yīng)蛋白抗體 THBS1

端粒酶相關(guān)蛋白2/端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體 TERT

四分子交聯(lián)體17抗體（四旋蛋白） TSPAN17

髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體 TREM1

血小板反應(yīng)蛋白2/敏感蛋白2抗體 Thrombospondin 2

緊密連接蛋白2抗體 TJP2

解整合素金屬蛋白酶5(ADAM5)重組蛋白大鼠Coptisine chloride 鹽酸黃連堿6020-18-420mg

DiI-Ac-LDL DiI標(biāo)記乙酰化低密度脂蛋白500ug瓶

Pyruvic acid 丙酮酸127-17-320mg

G-418 Sulfate 遺傳1g支

Glycolic acid 羥基乙酸100g瓶

ECH Sepharose 4B 羧基-糖凝膠 4B25mL瓶

Schaftoside 夏佛塔苷51938-32-020mg

Van Gieson 染色液（VG染色液，含蘇木素）3×50ml瓶

5-Fluoroorotic acid 5-氟乳清酸703-95-720mg

圓蓋玻片 直徑18mm100片盒

HRP標(biāo)記鏈霉親和素0.1ml支

48孔培養(yǎng)板100塊/箱塊

Pepstatin A 胃抑制劑5mg支