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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)重組蛋白大鼠
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-13 11:34:47瀏覽次數(shù):135次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D1263 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Thymidine Phosphorylase (TP) |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D1263 |
英文名稱:Recombinant Thymidine Phosphorylase (TP)
TYMP; PDECGF; ECGF1; MNGIE; TP; HPD-ECGF; TdRPase; Platelet-Derived Endothelial Cell Growth Factor; Gliostatin
型號(hào):GOY-01D1263
酶與激酶
腫瘤免疫
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:59.2kDa
實(shí)際分子量:57kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ile33~Ala290 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):5.8
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:溶血磷脂酶Ⅲ(LYPLA3)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Lysophospholipase III (LYPLA3)
產(chǎn)品名稱:鉬輔因子合成蛋白2(MOCS2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Molybdenum Cofactor Synthesis 2 (MOCS2)
產(chǎn)品名稱:氨基?;?/span>2(ACY2)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Aminoacylase 2 (ACY2)
產(chǎn)品名稱:氨乙酰丙酸δ合酶2(ALAS2)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Aminolevulinate Delta Synthase 2 (ALAS2)
產(chǎn)品名稱:氨乙酰丙酸δ合酶2(ALAS2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Aminolevulinate Delta Synthase 2 (ALAS2)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
翻譯控制腫瘤蛋白抗體 TCTP
調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 TLK1
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環(huán)指蛋白9抗體 RNF9
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睪表達(dá)蛋白19A抗體 Tex19A
酸敏感性鉀離子通道蛋白抗體 TASK 3
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轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體 TCEB3
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U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
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M-TGE肉湯/M-TGE Broth奶制品中濾膜細(xì)菌計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞英文名稱:DH82
TE-10(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯TSB-YE 規(guī)格: 250g 用途: 廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別用于食品中李斯特氏菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN0184-2005,ISO標(biāo)...
M9肉湯/M9 BrothBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:P388
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基質(zhì)金屬2(MMP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)
改良MSRV培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 用途: 用于分離游動(dòng)性沙門氏菌 (Merck方法)
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