蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD)

AKU; HGO; Homogentisic Acid Oxidase; Homogentisicase; Homogentisate oxygenase

型號(hào)：GOY-01D1327

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：30.7kDa

實(shí)際分子量：27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Val190~Pro429 (Accession # O09173) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：組氨tRNA合成酶2(HARS2)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Histidyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (HARS2)

產(chǎn)品名稱：組氨tRNA合成酶2(HARS2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Histidyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (HARS2)

產(chǎn)品名稱：蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶1(PRMT1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Protein Arginine Methyltransferase 1 (PRMT1)

產(chǎn)品名稱：羥酰水解酶(HAGH)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Hydroxyacylglutathione Hydrolase (HAGH)

產(chǎn)品名稱：羥酰水解酶(HAGH)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Hydroxyacylglutathione Hydrolase (HAGH)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

線粒體輔酶還原酶核心蛋白2抗體 UQCRC2

/激酶受體相關(guān)蛋白抗體 Unrip

未分化胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子1抗體 UTF1

尾加壓素2抗體 Urotensin II

尾加壓素2相關(guān)肽抗體 UTS2D

荊豆凝集素1抗體 Ulex Europaeus Lectin 1

泛素相關(guān)蛋白1抗體（鼻咽癌相關(guān)基因20蛋白） UBAP1

廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體 Ubiquitously expressed transcript

子宮珠蛋白抗體 Uteroglobin

尿卟啉原脫羧酶抗體 UROD

泛素D抗體 Ubiquitin D

磷酸化信號(hào)淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體 phospho-SLAMF1 (Tyr281)

尿黑酸1,2-雙加氧酶(HGD)重組蛋白小鼠Kalii Dehydrographolidi Succinas 20mg

Cysteamine hydrochloride 半胱胺鹽酸鹽156-57-020mg

兔抗大鼠IgG（免疫血清）5ml支

多用冰盒0.2ml-0.5ml-1.5ml12-12-36孔盒

藍(lán)色預(yù)染次高分子量蛋白質(zhì)Marker10T支

Phenacetin丁25g瓶

Agrimol B 仙鶴草酚B（鑒別用）55576-66-410mg

Tryptone 胰蛋白胨500g瓶

Sulfamerazine 磺胺甲127-79-7100mg

PEG 20000 聚乙二醇 20000250g瓶

Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside 香葉木素-7-O-葡萄糖苷6559-91-720mg

PBS干粉(pH7.2-7.4 0.01M)2L包