蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Protein Kinase N1 (PKN1)

PAK1; DBK; PRK1; PRKCL1; Protein Kinase C-Like 1; Protein kinase PKN-alpha; Protein-kinase C-related kinase 1; Serine-threonine protein kinase N

型號(hào)：GOY-01D1410

酶與激酶

內(nèi)分泌學(xué)

骨骼代謝

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Cytoplasm. Nucleus. Endosome. Cell membrane; Peripheral membrane protein. Cleavage furrow. Midbod

預(yù)測(cè)分子量：32.9kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Phe615~Phe874 (Accession # Q16512) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Active Carboxylesterase 5A (CES5A)

產(chǎn)品名稱：羧酸酯酶3(CES3)活性蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Active Carboxylesterase 3 (CES3)

產(chǎn)品名稱：羧酸酯酶3(CES3)活性蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Active Carboxylesterase 3 (CES3)

二級(jí)目錄：天然蛋白/NP

產(chǎn)品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Native Carbonic Anhydrase II (CA2)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

14-3-3β抗體 14-3-3 beta

14-3-3τ蛋白抗體 14-3-3 Tau

SLAMF6抗體 SLAMF6

a-包襯蛋白抗體 SPECA

磷酸化突觸融合蛋白1抗體 phospho-Syntaxin 1a(Ser14)

線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬/載體蛋白抗體 SLC25A13

線粒體二羧酸載體蛋白11抗體 SLC25A11

eIF4E結(jié)合蛋白2抗體 4EBP2

轉(zhuǎn)錄因子Sox3抗體 Sox3

神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒蛋白5抗體 Secretogranin V

血清淀粉樣蛋白P成份抗體 Serum Amyloid P

突觸結(jié)合蛋白11抗體 Synaptotagmin XI

蛋白激酶N1(PKN1)重組蛋白人MetforMin Hydrochloride 鹽酸二5g瓶

HT Media Supplement (50×) Hybri-Max TM1VL瓶

Phenyl -Sepharose 6FF 苯基-糖凝膠 6FF25mL瓶

Hypoxanthine 1g瓶

Epinephrine hydrochloride 鹽酸329-63-5100mg

DL15000 DNA Ladder100T支

透析袋 扁寬45 截留分子量35000.5m/即用型管

D-Mannitol D-5kg桶

9-Methoxycamptothecin 9-甲氧基19685-10-020mg

盧戈碘液(革蘭氏染色)10ml瓶

Chrysoeriol 金圣草黃素491-71-45mg

Flavourzyme 風(fēng)味25g瓶

膜封閉液100ml瓶