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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-13 14:03:16瀏覽次數(shù):107次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D1421 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant p21 Protein Activated Kinase 4 (PAK4) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
p21蛋白激活激酶4(PAK4)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D1421 |
英文名稱:Recombinant p21 Protein Activated Kinase 4 (PAK4)
Serine/threonine-protein kinase PAK 4
型號(hào):GOY-01D1421
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::Cytoplasm
預(yù)測(cè)分子量:31.4kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Val299~Ser542 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):6.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
谷氨酰tRNA合成酶2(EARS2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Glutamyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (EARS2)MSE1; GluRS; Glutamate tRNA Ligase 2,Mitochondrial; Glutamyl-tRNA synthetase物種:Mouse,小鼠
葡萄糖苷酸酶β(GUSb)重組蛋白英文名稱:Recombinant Glucuronidase Beta (GUSb)GUS-B; MPS7; Beta-G1物種:Mouse,小鼠
肝脂酶(LIPC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)HL; HTGL; Hepatic Lipase; Hepatic triacylglycerol lipase; Lipase member C物種:Rat,大鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
抑癌基因SNF2β抗體 BRG-1
5-羥色胺受體3抗體 5-HTR3
血清應(yīng)答因子抗體 SRF
調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體 SREBP-1
泛素樣修飾體-1抗體 SUMO 1
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 STAT1
卵巢癌相關(guān)蛋白抗體 Spindlin 1
精相關(guān)抗原5抗體 MAP126
5脂氧合酶激活蛋白抗體 5-lipoxygenase activating protein
14-3-3 protein ζ/δ抗體 14-3-3 zeta+delta
核突觸蛋白-α抗體(N端) alpha-Synuclein (NT)
多糖核心蛋白抗體 SRGN
p21蛋白激活激酶4(PAK4)重組蛋白人細(xì)胞過濾篩(不銹鋼)400目個(gè)
Poly-L-Lysine多聚-L-賴(7-15萬) 促進(jìn)細(xì)胞貼壁生長25mg支
人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
LIM培養(yǎng)基/賴吲哚動(dòng)力培養(yǎng)基/賴靛基質(zhì)動(dòng)力培養(yǎng)基/LIM Medium用于鏈球菌的分離培養(yǎng);細(xì)菌的賴、吲哚和動(dòng)力復(fù)合生化試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠肥大細(xì)胞細(xì)胞英文名稱:P815
SW620(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Streptavidin 鏈霉親和素1mg支
組織金屬抑制因子2(TIMP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2)
NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
ZR-75-1(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
間隙連接蛋白43(CX43)重組蛋白英文名稱:Recombinant Connexin 43 (CX43)
血培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 用途: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10-...
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