蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Methylthioadenosine Phosphorylase (MTAP)

MSAP; S-methyl-5'-thioadenosine phosphorylase

型號(hào)：GOY-01D1590

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

肝臟磷酸果糖激酶(PFKL)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphofructokinase, Liver (PFKL)PFK-B; 6-phosphofructokinase type B; Phosphofructo-1-kinase isozyme B; Phosphohexokinase物種：Human，人

組織K(CTSK)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X物種：Human，人

肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphofructokinase, Muscle (PFKM)PFK1; PFKX; Phosphofructokinase 1; Phosphofructo-1-kinase isozyme A; 6-Phosphofructokinase Polypeptide X; Fructose-6-Phosphate 1-Phosphotransferase物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化粘著斑激酶抗體 Phospho-FAK(Tyr576/577) 0.1ml

腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體（鋅指蛋白5） GLI1/Zfp5 0.1ml

人類乳頭狀瘤病毒33抗體 HPV33 E7 0.2ml

胰島素樣生長(zhǎng)因子1抗體 IGF I 0.1ml

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2 GLUT2 0.1ml

Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體 WASF3 0.2ml

FC段γ受體3/免G Fc段受體III抗體 IGFR3/CD16 0.1ml

細(xì)胞色素P450 2W1抗體 CYP2W1 0.2ml

丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體 CHCHD2 0.2ml

癌癥拉鏈下調(diào)因子1抗體 LDOC1/BCUR1 0.2ml

軸周蛋白PRX抗體 PRX/periaxin 0.1ml

酸性核磷蛋白32家族B抗體 PHAPI2/APRIL 0.2ml

甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)重組蛋白小鼠亞鹽/Sulfite Agar厭氧亞鹽還原桿菌試管計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

腦心浸液/心浸液/BHI/BHI Agar用于培養(yǎng)各種細(xì)菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠正常肝細(xì)胞英文名稱：BRL-3A

Calu-1(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)

小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

哥倫比亞血基礎(chǔ)/Columbia Blood Agar Base各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

抵抗素樣蛋白β(RETNLβ)重組蛋白英文名稱：Recombinant Resistin Like Beta (RETNLb)

蛋白激酶Cδ(PKCδ)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

小鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

改良番茄汁培養(yǎng)基/改良番茄汁/Tomato Juice Agar Modified食品中酸菌總數(shù)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

肝細(xì)胞HBV病毒株英文名稱：

BEL-7402(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2