蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Proteasome Activator Subunit 3 (PSME3)

Ki; PA28G; REG-GAMMA; 11S regulator complex subunit gamma; Activator of multicatalytic protease subunit 3; Ki nuclear autoantigen; Proteasome activator 28 subunit gamma

型號：GOY-01D1597

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：32.6kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Val7~Tyr254 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：>90%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產(chǎn)品：

碳酸酐酶Ⅸ(CA9)真核蛋白英文名稱：Eukaryotic Carbonic Anhydrase IX (CA9)CA-IX; CAIX; MN; pMW1; P54/58N; Carbonic Dehydratase; Renal cell carcinoma-associated antigen G250; RCC-Associated Protein G250; Carbonate dehydratase IX物種：Human，人

羧肽酶A3(CPA3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carboxypeptidase A3 (CPA3)MC-CPA; Mast cell carboxypeptidase A; Carboxypeptidase A3, Mast Cell物種：Mouse，小鼠

鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱβ(CAMK2b)重組蛋白英文名稱：Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Beta (CAMK2b)CAM2; CAMK2; CAMKB; Proline Rich Calmodulin-Dependent Protein Kinase物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

缺氧誘導基因95抗體 SESN2/Hi95 0.2ml

T淋巴細胞易位蛋白2抗體 LMO2 0.2ml

肌動蛋白結合蛋白CORO1A抗體 Coronin 1a 0.2ml

小泛素相關修飾蛋白1抗體 SENP1 0.2ml

泛素連接酶CUL7蛋白抗體 Cullin 7 0.2ml

腫瘤壞死因子受體相關蛋白2抗體 Proteasome 26S S2/TRAP2 0.2ml

環(huán)指蛋白23抗體 RNF23 0.2ml

信號通路Wnt16抗體 Wnt16 0.2ml

14號染色體開放閱讀框106抗體 KNL2/C14orf106 0.2ml

20號染色體開放閱讀框132抗體 C20orf132 0.2ml

APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體 APP/ABPP 0.1ml

補體因子H相關蛋白1抗體 CFHL1 0.2ml

蛋白酶激活亞基3(PSME3)重組蛋白人L-Xylose L-木糖609-06-320mg

Peptone 蛋白胨250g瓶

Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ50g瓶

anti-HA Tag Mouse Monoclonal antibody100ul瓶

Konjac glucomannan 魔芋甘露聚糖37220-17-020mg

5×考馬斯亮藍G-250(蛋白定量用)500ml瓶

Penicillin G potassium salt 青G鉀鹽1MU瓶

羊抗人原（免疫血清）0.5ml支

超濾離心管 4ml-50KD4ml個

20×SSC pH7.0500ml瓶

Dauricine 蝙蝠葛堿524-17-420mg

2×Taq PCR MasterMix (不含染料)1ml支