蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Transketolase (TKT)

TK; Wernicke-Korsakoff Syndrome

型號(hào)：GOY-01D1645

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：34.9kDa

實(shí)際分子量：35kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Lys286 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：7.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶2(IRAK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 2 (IRAK2)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物種：Human，人

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2a)重組蛋白英文名稱：Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha (CAMK2a)CAMKA物種：Mouse，小鼠

N-?；拾贝减０匪饷?(ASAH2)重組蛋白英文名稱：Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 phospho-PKMYT1(Thr495) 0.1ml

磷酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 phospho-RAD9(Tyr28) 0.1ml

克拉拉細(xì)胞蛋白抗體 CC16/CCSP 0.1ml

特異性DMRT3蛋白抗體 DMRT3 0.2ml

Ras樣蛋白家族10A抗體 RASL/RASL10A 0.2ml

結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體 CITED1/ABCC1 0.2ml

磷酸化HER4抗體 Phospho-HER4 (Tyr1188) 0.1ml

磷酸化CREB-1抗體 phospho-CREB-1(Ser133) 0.1ml

細(xì)胞色素P450 1A2抗體 P450 1A2/CYP1A2 0.2ml

結(jié)蛋白抗體 Desmin/DES 0.1ml

表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 EGFR 0.1ml

基膜聚糖蛋白抗體 Lumican 0.2ml

轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)重組蛋白大鼠BC-009(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

黏病毒耐藥蛋白1(MX1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Myxovirus Resistance 1 (MX1)

GVC增菌液 規(guī)格： 250g 用途： 用于椰毒假單胞菌酵米面亞種的

ASS/抗菌素磺胺類敏感試驗(yàn)/ASS Agar用于磺胺類靈敏度試驗(yàn)（WHO方法）250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

月桂基鹽胰蛋白胨肉湯/LST肉湯/LST Broth各種食品中大腸菌群最近似值(MPN)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

NCI-H1975(人肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

3.5% NaC1賴脫羧酶發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

胰胨大豆斜面/TSA/Tryptic Soy Agar培養(yǎng)副溶血性弧菌，做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

AML-193(人急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)

萬(wàn)古(改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯凍干配套試劑) 規(guī)格： 10支/盒 用途： 每支添加于100ml（022212）中配成MLST