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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白人
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-17 08:48:15瀏覽次數(shù):308次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D2220 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Carbonic Anhydrase VIII (CA8) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2220 |
英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase VIII (CA8)
CAVIII; CA-VIII; CALS; CARP; Carbonic anhydrase-related protein
型號(hào):GOY-01D2220
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:36.7KDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Met1~Gln290 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
葡萄牙假絲酵母 Candida lusitaniae蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae
去氧紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Deoxyshikonin
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基
Tariquidar,XR-9576 質(zhì)量規(guī)格:>98%,P-糖蛋白抑制劑 Tariquidar,XR-9576
燒土正青霉 Eupenicillium inusitatum香菇 Lentinula edodes
雙水楊酯;水楊-2-羧基酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Sasapyrine
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
鈦黃;達(dá)旦黃;鈦鎳黃 質(zhì)量規(guī)格:BS Titan yellow
絲蓋小苞腳菇 Volvariella bombycina脈孢菌 Neurospora sp.
雙水楊酯 ;水楊-2-羧基酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Sasapyrine
小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基人黑色素瘤細(xì)胞
鹽魯 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Lurasidone HCl
大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基JEC, 人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞系
鹽魯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Lurasidone HCl
土曲霉 Aspergillus terreus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
櫻黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Prunetin
碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白人高滲真菌學(xué)瓊脂 Osmophilic Mycophile Agar 250g
大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2 ug pACT-MyoD pACT-MyoD 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人妊娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
50次 柱式昆蟲DNAout Column Insect DNAOUT 常溫
2 ug pSilencer 4.1-CMV puro pSilencer 4.1-CMV puro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250mL Sodium Borate Buffer(硼酸鈉緩沖液),0.5M,pH9.0 Sodium Borate Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存
人存活素抗體/生存蛋白(Surv)免疫試劑盒
含225mlEC肉湯均質(zhì)袋 10個(gè)/包
猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
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