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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 磷脂酰肌醇-4-激酶α(PI4Ka)重組蛋白人
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-17 09:04:45瀏覽次數(shù):177次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D2248 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phosphatidylinositol-4-Kinase Catalyti |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
磷脂酰肌醇-4-激酶α(PI4Ka)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2248 |
英文名稱:Recombinant Phosphatidylinositol-4-Kinase Catalytic Alpha (PI4Ka)
PIK4CA; PI4K-ALPHA; pi4K230
型號:GOY-01D2248
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:64.1kDa
實際分子量:64kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Met1~Trp300 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:9.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
磷脂酶A2激活蛋白(PLAP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Phospholipase A2 Activating Protein (PLAP)PLAA; PLA2P; PLA2-P; DOA1物種:Human,人
基質(zhì)金屬12(MMP12)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)MME; HME; ME; Macrophage Metalloelastase; Macrophage Elastase物種:Rat,大鼠
基質(zhì)金屬9(MMP9)真核蛋白英文名稱:Eukaryotic Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
菜豆根瘤菌 Mesorhizobium phaseoli香菇 Lentinula edodes
普樂沙福,CXCR抑制劑 質(zhì)量規(guī)格:>99%,CXCR4趨化因子受體拮抗劑 Plerixafor,AMD3100
Tissue Protein Extraction Kit/組織蛋白抽提試劑盒腺腺/耐藥株
A-779 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR (D-Ala7)-Angiotensin I/II (1-7);A779
大豆慢生根瘤菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
二甲(標(biāo)準(zhǔn)品)) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 Benzophenone
球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基
甲(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),進分 Benzophenone
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis節(jié)桿菌 Arthrobacter sp.
鹽哌侖西平 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Pirenzepine dihydrochloride
FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源)
醋磺米隆 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Mafenide Acetate
球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
中間體I 質(zhì)量規(guī)格:>97% Bortezomib intermediates I
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti葡枝根霉
蒎二酯 質(zhì)量規(guī)格:>97% BortezoMib Pinanediol Ester
磷脂酰肌醇-4-激酶α(PI4Ka)重組蛋白人10mg DAPI干粉 DAPI Powder -20℃干燥避光保存
兔子硫酸類肝素(HS)免疫試劑盒進口、分裝
腦心浸出液肉湯(BHI)GB標(biāo)準(zhǔn) Brain Heart Influsion Broth 250g
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒進口、分裝
1 管 KM 71酵母菌 KM71 Yeast Strain -80℃保存
2 ug pEYFP-Golgi pEYFP-Golgi 低溫運輸,-20℃保存
人皮質(zhì)抑素/穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒
2mL dCTP溶液,2.5mM dCTP Solution -20℃保存
兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)免疫試劑盒進口、分裝
大腸桿菌成套生化鑒定管 4種*4套
100mL 甲酰胺 Formamide 4℃保存
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