蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Integrin Linked Kinase (ILK)

ILK1; P59; 59 kDa serine/threonine-protein kinase

型號(hào)：GOY-01D2269

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：34.5kDa

實(shí)際分子量：35kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Asn183~Lys452 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：8.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)重組蛋白英文名稱：Recombinant Deoxyhypusine Hydroxylase/Monooxygenase (DOHH)HLRC1; HEAT-Like(PBS Lyase)Repeat Containing 1; Deoxyhypusine dioxygenase; Deoxyhypusine monooxygenase物種：Human，人

β-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(b4GALT1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Beta-1,4-Galactosyltransferase 1 (b4GALT1)GTB; B4-GALT1; GGTB2; GT1; Beta4Gal-T1; Lactose Synthase A Protein; N-Acetyllactosamine Synthase; Nal synthase; beta-N-acetylglucosamine beta-1,4-galactosyltransferase 1物種：Human，人

鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Sphingosine Kinase 2 (SPHK2)酶與激酶物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

磺間二鈉 質(zhì)量規(guī)格：>98% Sulfadimethoxine sodium salt

 釀酒酵母橢圓變種 Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoides香菇 Lentinula edodes

磺間二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfadimethoxine sodium salt

 小鼠皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

柯諾辛堿 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品 Corynoxine

 臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereusC918(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)

毛地黃毒苷配基 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(LCDigitoxigenin

 宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Urapidil

 香菇 Lentinula edodes肝細(xì)胞HBV病毒株

夫西地鈉 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR Fusidate Sodium

 BCIP/NBT堿性酶顯色試劑熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

夫西地鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Fusidate Sodium

 無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

3,5-二-L-酪氨 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate

整合素連鎖激酶(ILK)重組蛋白人2 ug pGBK-53 pGBK-53 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100mL Tricine Buffer,0.5M,pH9.0  Tricine Buffer,0.5M,pH9.0  常溫保存

2 ug pMAD pMAD 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

2 ug pUB6/V5 His C pUB6/V5 His C 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

1瓶 BGC-803細(xì)胞株 BGC-803 低溫運(yùn)輸和保存

1瓶 HuH-6細(xì)胞株 HuH-6 低溫運(yùn)輸和保存

兔子肌鈣蛋白C(TnC)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

50T 新城疫病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

1瓶 A375細(xì)胞株 A375 低溫運(yùn)輸和保存

2 ug pYr-1.1-hU6-EGFP（可包裝腺病毒） pYr-1.1-hU6-EGFP（可包裝腺病毒） 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

大鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝