蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Pyridoxamine-5'-Phosphate Oxidase (PNPO)

PDXPO; Pyridoxine 5'-Phosphate Oxidase

型號：GOY-01D2281

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：33.8kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Pro261 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

過氧化還原酶5(PRDX5)重組蛋白英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 5 (PRDX5)PLP; PRDX6; ACR1; PMP20; PRXV; SBBI10; Thioredoxin Peroxidase PMP20; Peroxisomal Antioxidant Enzyme; TPx Type VI; Liver Tissue 2D-Page Spot 71B; Alu Co-Repressor 1物種：Mouse，小鼠

多功能肽酶2(PSMB9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Proteasome subunit beta type-9 (PSMB9)LMP2; Proteasome(Prosome,Macropain)Subunit Beta Type 9; Macropain chain 7; Multicatalytic endopeptidase complex chain 7; Really interesting new gene 12 protein; Large Multifunctional Peptidase 2物種：Mouse，小鼠

琥珀酸脫氫酶復(fù)合體D亞基(SDHD)重組蛋白英文名稱：Recombinant Succinate Dehydrogenase Complex Subunit D (SDHD)PGL; PGL1; QPs3; Succinate-ubiquinone reductase membrane anchor subunit; Succinate dehydrogenase [ubiquinone] cytochrome b small subunit, mitochondrial物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis中華鱉脾來源細(xì)胞

腺嘌呤，維生素B4 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Adenine phosphate

 RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基

  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Hypoxanthine

 大孢子鏈霉菌 Streptomyces macrosporeus費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

 (標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Guanine

 熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens片球菌 Pediococcus sp.

  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Guanine

 狗肺成纖維樣細(xì)胞NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺細(xì)胞)

水溶性四唑-8;WST-8 質(zhì)量規(guī)格：BR,>97% Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae傘枝梨霉 Absidia corymbifera

水溶性四唑-5 質(zhì)量規(guī)格：BR GLT005

 牛鏈球菌 Streptococcus bovis棉阿舒囊霉 Ashbya gossypii

水溶性四唑-4 質(zhì)量規(guī)格：BR GLT004

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基

積雪草 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BR Asiatic acid

吡哆胺-5'-磷酸氧化酶(PNPO)重組蛋白小鼠人游離三碘甲狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

豬活化蛋白C(APC)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

雞窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠2,3-二甘油酸(2,3-DPG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1 管 GS200酵母菌 GS190 Yeast Strain -80℃保存

1瓶 HeLa S3 [HeLaS3]細(xì)胞株 HeLa S3 [HeLaS3] 低溫運輸和保存

兔子膠原II(Collagenase II)免疫試劑盒

小鼠成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

人組織蛋白S(CTSS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠4-羥基壬烯酸(HNE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

50T 腸道腺病毒40型PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存