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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)重組蛋白人

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產品型號

            品       牌其他品牌

            廠商性質經銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2023-03-17 11:41:47瀏覽次數:136次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網
            供貨周期 現貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
            貨號 GOY-01D2127 應用領域 化工
            主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (AS
            物種 Homo sapiens (Human,人)
            N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)重組蛋白人公司正在出售的產品:緊密連接蛋白15抗體 英文名稱:Claudin 15 0.1ml緊密連接蛋白12抗體 英文名稱:Claudin 12 0.1ml磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體 英文名稱:phospho-CHEK1 (Ser286) 0.1ml

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            產品屬性:

            產品名稱

            物種

            貨號

            N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)重組蛋白人

            Homo sapiens (Human,人)

            GOY-01D2127

             

             

            英文名稱:Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)

            HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase

            型號:GOY-01D2127

            酶與激酶

            物種:Homo sapiens (Human,人)

            來源:原核表達

            宿主E.coli

            內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

            亞細胞定位::細胞膜, 分泌, 高爾基體

            預測分子量:50.4kDa

            實際分子量:21&40&56kDa(差異分析請參閱說明書)

            片段與標簽:Ala451~Ile780 with Two N-terminal Tags, His-tag and SUMO-tag

            緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

            性狀:凍干粉

            純度:> 90%

            等電點:6.7

            應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

            規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

            圖片3.png
            蛋白表達及純化:

            1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。

            2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

            3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

            4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

            5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

            交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。

            操作步驟:

            Ⅰ 實體組織蛋白的提取

            1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

            2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

            3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;

            4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

            5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

            Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

            1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液;

            2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;

            3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

            4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

             

            細胞數量

            Lysis Buffer加入量

            107個

            0.5 mL~1 mL

            5×106個

            0.2 mL~0.5 mL

             

             

            5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

            6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

            7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

            公司正在出售的產品:

            戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus植物桿菌 Lactobacillus plantarum

            N-乙酰-L-氨 質量規(guī)格:98%,BR Ac-Ala-OH

             毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes尖頂羊肚菌 Morchella conica

            N-乙酰-D-氨 質量規(guī)格:98%,BR N-Acetyl-D-alanine

             5637(人膀胱細胞)QGY-7701, 人肝細胞

            N-乙酰-L-酪氨 質量規(guī)格:0.98 N-Acetyl-L-Tyrosine

             大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum人小梁網細胞培養(yǎng)基

            N-乙酰-L-谷氨酰 質量規(guī)格:>98%,BR N-Acetyl-L-Glutamine

             泡盛曲霉 Aspergillus awamori地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

            甲基橙(生物染色) 質量規(guī)格:BS Methyl orange

             百脈根根瘤菌 Rhizobium loti大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

            分散橙13 質量規(guī)格:90%,進口分包 Disperse Orange 13

             P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)CaES-17(人食管細胞)

            性橙74 質量規(guī)格:>85% Acid Orange 74

             正灰綠正青霉 Eupenicillium euglaucum爪哇根霉 Rhizopus javanicus

            煌橙,藏花橙G 質量規(guī)格:BS Crocein Orange G

            N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)重組蛋白人CVT瓊脂 CVT Agar 250g

            植物玉米素核苷(ZR)免疫試劑盒現貨供應

            人神經型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒進口、組裝

            2 ug pQE-80L pQE-80L 低溫運輸,-20℃保存

            大鼠鈣調(CaN)免疫試劑盒

            小鼠胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒

            兔纖溶抑制因子(TAFI)免疫試劑盒現貨供應

            5mg 衣 Tunicamycin 4℃保存

            15mL  Hematoxylin Staining Solution 室溫保存

            2 ug pCAMBIA1305.2 pCAMBIA1305.2 低溫運輸,-20℃保存

            人沙眼衣原體抗原(CT)免疫試劑盒進口、組裝

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