蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Enolase 3 (ENO3)

MSE; Beta Enolase; Enolase 3; 2-phospho-D-glycerate hydro-lyase; Skeletal muscle enolase

型號：GOY-01D2158

酶與激酶

代謝通路

心腦血管

骨骼代謝

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：Cytoplasm

預(yù)測分子量：46.1kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Lys391 (Accession # P13929) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：8.4

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9)FH3; HCHOLA3; NARC1; Hypercholesterolemia,Autosomal Dominant 3; Neural apoptosis-regulated convertase 1; Proprotein convertase 9; Subtilisin/kexin-like protease PC9物種：Human，人

蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱα(MAT2a)重組蛋白英文名稱：Recombinant Methionine Adenosyltransferase II Alpha (MAT2a)SAMS2; MATA2; AMS2; MATII; S-adenosylmethionine synthase isoform type-2物種：Rat，大鼠

巖藻糖-1-磷酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶(FPGT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Fucose-1-Phosphate Guanylyltransferase (FPGT)GFPP; GDP-L-fucose pyrophosphorylase; GDP-L-fucose diphosphorylase物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii人小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

盧立唑 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Luliconazole

 Streptavidin-HRP(Ready to Use)/Streptavidin-HRP(IHC工作液)洛格酵母 Saccharomyces logos

5-硝基-1,10-菲咯啉;5-硝基鄰菲啰啉 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 5-Nitro-1,10-phenanthroline

 香菇 Lentinula edodesGH3, 大鼠垂體生激素腺瘤

酚藍(lán)鈉 質(zhì)量規(guī)格：AR Bromophenol blue sodium salt

 植物桿菌 Lactobacillus plantarum喜鹽芽胞桿菌 Halobacillus sp.

鐵冬青(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rotundic acid

 人胃細(xì)胞異常漢遜酵母 Hansenula anomala

百里香酚蘭鈉 質(zhì)量規(guī)格：AR Thymol blue sodium salt

 lovo, 人結(jié)腸細(xì)胞繩狀青霉

四硼鈉 質(zhì)量規(guī)格：AR Sodium tetraphenylboron

 異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala人神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基

磺基水楊鈉 質(zhì)量規(guī)格：AR Sodium sulfosalicylate

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumQBC-939, 人膽管細(xì)胞

亞硝基紅鹽 質(zhì)量規(guī)格：AR Nitroso R Salt

烯醇化酶(ENO3)重組蛋白人脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂 SkimMilkSucroseCaseinDigest Agar Medium 250g

小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

50T 芥末PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

MH肉湯（MHB） Mueller-Hinton Broth 250g

大鼠端粒(TE)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

人帶3蛋白(Band3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

100g 氯化鎂六水 Magnesium Chloride, Hexahydrate 室溫干燥保存

1瓶 4T1細(xì)胞株 4T1 低溫運輸和保存

豬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

人 Liprin alpha 1 免疫試劑盒進(jìn)口、組裝