蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Deoxyribonuclease II Beta (DNASEIIb)

DNase-IIb; DNase2b; DNase2-b; DLAD; DNASE2-Like Acid DNase; Endonuclease DLAD

型號(hào)：GOY-01D2608

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：68.3kDa

實(shí)際分子量：68kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Thr23~Asn356 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

解整合素金屬8(ADAM8)重組蛋白英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 8 (ADAM8)CD156-A; MS2; CD156a; Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 8物種：Mouse，小鼠

N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)Alpha-N-Acetylgalactosaminidase; Alpha-galactosidase B物種：Mouse，小鼠

補(bǔ)體成分9(C9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Complement Component 9 (C9)酶與激酶物種：Rabbit，兔

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細(xì)胞)無花果曲霉 Aspergillus ficuum

2,7-二-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene

 新月彎孢霉 Curvularia lunata根瘤菌

2,5-二噻唑(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) 2,5-Dibromothiazole

 考馬斯亮藍(lán)R-250釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

2,6-二萘(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 2,6-Dibromonaphthalene

 人參刺盤孢 Colletotrichum panacicolaSNU-5(人胃細(xì)胞)

2,5-二硒酚(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 2,5-Dibromoselenophene

 mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

1,3-二-7-叔丁基芘(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) 1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene

 野生鏈球菌 Streptococcus ferus芽孢桿菌 Bacillus laevolacticus

6,12-二屈(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 6,12-Dibromochrysene

 豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene

 IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)MCF-7(人腺細(xì)胞)

2,7-二菲-9,10-二(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) 2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione

脫氧核糖核酸酶Ⅱβ(DNASEIIb)重組蛋白大鼠小鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

1瓶 NCI-H520細(xì)胞株 NCI-H520 低溫運(yùn)輸和保存

山羊甘肽還原(GSR)免疫試劑盒

50T 犬細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50U Furin 蛋白 Furin Protease -20℃保存

250mL Sodium Chloride Solution（氯化鈉溶液），0.9%   Sodium Chloride Solution，0.9%   常溫保存

魚胰島素(INS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

人細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

1瓶 LNcap cloneFGC（GFP）細(xì)胞株 LNcap cloneFGC（GFP） 低溫運(yùn)輸和保存

MEM維持液 MEM maintenance of fluid 36支/盒