蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 3 (SMPD3)

NSMASE2; Neutral Sphingomyelinase II

型號：GOY-01D2630

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：29.9kDa

實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Asp417~Gly651 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：4.8

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產(chǎn)品：

Recombinant Arachidonate-12-Lipoxygenase, 12R Type (ALOX12B)產(chǎn)品名稱：花生四烯酸-12-脂加氧酶12R(ALOX12B)重組蛋白物種：Human，人LOX12B; 12R-LOX; Lipoxygenase, 12R; Epidermis-type lipoxygenase 12

Recombinant Cathepsin K (CTSK)產(chǎn)品名稱：組織K(CTSK)重組蛋白CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X

Recombinant Acetylserotonin-O-Methyltransferase (ASMT)產(chǎn)品名稱：乙酰復合胺-O-甲基轉移酶(ASMT)重組蛋白物種：Human，人HIOMT; ASMTY; HIOMTY; Hydroxyindole O-methyltransferase

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

白地霉 Geotrichum candidum

三丁基化锍(>96.0%(T)) 質量規(guī)格：>96.0%(T) Tributylsulfonium Iodide

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

螺[1,3,3-三甲基吲哚并二氫吡喃][光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T)) 質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound]

桿菌 Lactobacillus sp.

3,3-二基-3H-萘并[2,1-b]吡喃(>98.0%(HPLC)) 質量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 3,3-Diphenyl-3H-naphtho[2,1-b]pyran

NCI-H23(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2

1,3,3-三甲基吲哚-奈諤嗪(>98.0%(HPLC)(T)) 質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 1,3,3-Trimethylindolinonaphthospirooxazine [Photochromic Compound]

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

硫靛紅 質量規(guī)格： Thioindigo

NCI-N87 [N87]人胃細胞

亞油酯(>95.0%(T)) 質量規(guī)格：>95.0%(T) Cholesterol Linoleate

宋氏志賀氏菌 Shigella sonnei

棕櫚酯(>97.0%(T)) 質量規(guī)格：>97.0%(T) Cholesterol Palmitate

栗色渾圓鏈霉菌 Streptomyces castaneoglobosus

正辛酯(>95.0%(GC)) 質量規(guī)格：>95.0%(GC) Cholesterol n-Octanoate

鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重組蛋白人人艾柯病毒IgG(ECHO IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

2 ug pLentG-KOSM pLentG-KOSM 低溫運輸，-20℃保存

小鼠β半乳糖苷(βGAL)免疫試劑盒進口、分裝

人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

1個 0.5mLDNA超濾離心管(9-15KD)  

1瓶 SiHa細胞株 SiHa 低溫運輸和保存

貓白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠脂肪甘油三酯脂(ATGL)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

5g N,N- 雙 (2-  )-3- 氨基乙磺酸 BES 室溫避光保存

小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠內皮抑素(ES)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應