蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Pseudouridylate Synthase 1 (PUS1)

MLASA; tRNA pseudouridine(38-40) synthase; tRNA pseudouridine synthase A, mitochondrial; tRNA-uridine isomerase I

型號(hào)：GOY-01D2694

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：51.2kDa

實(shí)際分子量：53kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Met1~Asp423 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：9.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Proteasome Activator Subunit 4 (PSME4)產(chǎn)品名稱：激活亞基4(PSME4)重組蛋白物種：Human，人PA200; Proteasome activator PA200

Recombinant Matrix Metalloproteinase 19 (MMP19)產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬19(MMP19)重組蛋白物種：Human，人RASI-1; MMP18; Occasionally Referred To As Stromelysin-4

Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3)產(chǎn)品名稱：賴氨酰氧化酶樣蛋白3(LOXL3)重組蛋白物種：Mouse，小鼠LOXL; Lysyl oxidase homolog 3

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

松口蘑 Tricholoma matsutake

2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒(>98.0%(HPLC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran

 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞英文名稱：

3',6'-二基熒(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 3',6'-Dimethoxyfluoran

 土生假絲酵母 Candida humicola

2-萘基芐基(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) Benzyl 2-Naphthyl Ether

 大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) 1,1'-Methylenedi-2-naphthol

 單核細(xì)胞增生李氏桿菌 Listeria monocytogenes

己酰(>98.0%(N)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N) Hex*

 KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))5×106cells/瓶×2

二酯(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) Diphenyl Carbonate

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

二芐基亞砜(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) Dibenzyl Sulfoxide

 禾頂囊殼小麥變種 Gaeumannomyces graminis var. tritici

乙二二(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) Ethylene Glycol Diphenyl Ether

假尿苷酸合酶1(PUS1)重組蛋白小鼠大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

厭氧肉肝湯培養(yǎng)基 Anaerobic Beef Liver Broth 250g

人非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

2 ug pmiRZip anti-microRNA pmiRZip anti-microRNA 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50T 單增李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

250mL 動(dòng)物DNAout Animal DNAOUT 常溫

2 ug pMUTIN4 pMUTIN4 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

大鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

50次 通用型RT-LAMP試劑盒 Universal RT-LAMP Kit -20℃保存

人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)免疫試劑盒

四環(huán)素檢定瓊脂 Tetracyline Examination Agar 250g