免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

商品屬性：

規(guī)格 50ul 100ul 200ul

產(chǎn)品分類 抗體 / 一抗

英文名稱 ：KRT34

英文別名  Ha 4; HA4; Hair keratin; Hair keratin, type I Ha4; Hard keratin type I 4; HHA4; HKA4; K34; Keratin 34; Keratin; Keratin, hair, acidic, 4; Keratin, type I cuticular Ha4; Keratin-34; KRT34; KRT34_HUMAN; KRTHA4; type I cuticular Ha4; type I Ha4.

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat

標(biāo)記  Unconjugated

抗體來源  Rabbit

抗體類型  Polyclonal

免疫原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human KRT34

蛋白細(xì)胞定位  細(xì)胞漿,細(xì)胞外基質(zhì),分泌型蛋白

純化方法  affinity purified by Protein A

亞型  IgG

性狀  Liquid

濃度  1mg/ml

儲存液  0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件  Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

背景資料 ：

抗體制備過程：

1.材料與試劑

a．提取的動物 Ig

b．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

d．實(shí)驗(yàn)動物 兔

e．其它材料及試劑

2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。

3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。

4、試取血樣進(jìn)行測試，查看免疫效果。

5、如果免疫成功，殺死實(shí)驗(yàn)活體，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

相關(guān)產(chǎn)品：

犬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒牛腺病毒7型試劑盒ELISA BAV-7 ELISA Kit昆蟲半胱氨酰氨肽酶ELISA試劑盒 LNPEP ELISA Kit人巢蛋白(NES) ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為殘基,殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

（三）操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

下列是公司正銷售的產(chǎn)品：

人白介素25(IL25/C19orf10)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒，英文名：BMPR-Ⅱ ELISA Kit

維生素E 訂購|咨詢 規(guī)格： 200mg

 人胱硫γ裂解酶 (Cystathionine gamma-lyase)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒，英文名：IL-33 ELISA Kit

蒲公英 訂購|咨詢 規(guī)格： 0.5g

 人Disks大同系物4 ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠自身免疫調(diào)節(jié)因子(AIRE)ELISA試劑盒，英文名：AIRE ELISA Kit

熊果 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 人歸巢相關(guān)細(xì)胞黏附分子/CD44分子(HCAM/CD44)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠B細(xì)胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒，英文名：BAFF ELISA Kit

甘草苷 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg

 人Adropin(ENHO)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠腺苷環(huán)化酶10(ADCY10)ELISA試劑盒，英文名：ADCY10 ELISA Kit

藁本內(nèi)酯 訂購|咨詢 規(guī)格： 約0.1mL

 人纖維膠凝蛋白1(FCN1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5)ELISA試劑盒，英文名：FABP5 ELISA Kit

四環(huán)素 訂購|咨詢 規(guī)格： 200mg

 人谷氨草酰乙轉(zhuǎn)氨酶1樣蛋白1(GOT1L1)ELISA試劑盒人96T3.9-250 pg/mL小鼠跨膜絲氨2(TMPRSS2)ELISA試劑盒，英文名：TMPRSS2 ELISA Kit

 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

 人70 kDa熱休克相關(guān)蛋白2(HSP72)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠谷氨脫羧酶2(GAD2)ELISA試劑盒，英文名：GAD2 ELISA Kit

白樺脂 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

毛發(fā)角蛋白34抗體2 ug pGEX-4T- 3 pGEX-4T- 3 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人纖維母細(xì)胞生長因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

1瓶 U-2 OS-Luc teT-on細(xì)胞株 U-2 OS-Luc teT-on 低溫運(yùn)輸和保存

氯化鈉營養(yǎng)瓊脂 NaCl Nutrient Agar 250g

50mL EGTA Solution（EGTA溶液）,1M,pH8.0  EGTA Solution,1M,pH8.0  常溫保存

人基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

李氏菌增菌肉湯（LB1） Listeria Enrichment Broth Base 9ml*20支/包

大鼠層連蛋白/板層素(LN)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

2500U 末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移  

紅煌綠瓊脂 Phenol Red Brilliant Green Agar 250g

大鼠鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激激(CaMKK)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝