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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15201736385

            細(xì)胞
            elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
            PCR檢測(cè)試劑盒
            質(zhì)粒
            定量PCR試劑盒
            生化檢測(cè)試劑盒
            科研細(xì)胞
            天然蛋白、重組蛋白

            人外周T細(xì)胞的分離與鑒定

            時(shí)間:2017/4/27閱讀:1095
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            材料:淋巴細(xì)胞株懸液、1%SRBC懸液、滅活之小牛血清、離心管、試管、吸管、載玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。 

            方法
            (1)取上述配好之淋巴細(xì)胞懸液0.1ml于潔凈小試管中,加入1%SRBC懸液0.1ml。再加入小牛血清0.1ml,混勻,置37℃水浴箱中5分鐘,500轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,放4℃冰箱2-24小時(shí)。 
            (2)從冰箱中取出試管,留適量上清液,輕輕搖勻,加0.8%戊二醛2滴,輕搖后,置4℃冰箱15分鐘,取出,作成涂片,待自然干燥,以瑞氏染液染色。 
            (3)計(jì)數(shù):鏡下觀(guān)察,凡結(jié)合三個(gè)以上SRBC的T細(xì)胞株即為E-RFC,計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞,求出E-RFC占淋巴細(xì)胞總數(shù)的百分率。 
            結(jié)果
            一般認(rèn)為E-RFC的正常值在60%以上,如少于50%則為低下。如欲分離T細(xì)胞,可用密度梯度離心,E-RFC因比重增大而沉于管底,與其他細(xì)胞株分離;用低滲法裂解花結(jié)中的SRBC,即可獲得純化的T細(xì)胞。 

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