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當(dāng)前位置：上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>人外周T細(xì)胞的分離與鑒定
材料：淋巴細(xì)胞株懸液、1%SRBC懸液、滅活之小牛血清、離心管、試管、吸管、載玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。
方法
（1）取上述配好之淋巴細(xì)胞懸液0.1ml于潔凈小試管中，加入1%SRBC懸液0.1ml。再加入小牛血清0.1ml，混勻，置37℃水浴箱中5分鐘，500轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘，放4℃冰箱2-24小時(shí)。
（2）從冰箱中取出試管，留適量上清液，輕輕搖勻，加0.8%戊二醛2滴，輕搖后，置4℃冰箱15分鐘，取出，作成涂片，待自然干燥，以瑞氏染液染色。
（3）計(jì)數(shù)：鏡下觀(guān)察，凡結(jié)合三個(gè)以上SRBC的T細(xì)胞株即為E-RFC，計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞，求出E-RFC占淋巴細(xì)胞總數(shù)的百分率。
結(jié)果
一般認(rèn)為E-RFC的正常值在60％以上，如少于50％則為低下。如欲分離T細(xì)胞，可用密度梯度離心，E-RFC因比重增大而沉于管底，與其他細(xì)胞株分離；用低滲法裂解花結(jié)中的SRBC，即可獲得純化的T細(xì)胞。
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