狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級會(huì)員 | 第10年

            15201736385

            細(xì)胞
            elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
            PCR檢測試劑盒
            質(zhì)粒
            定量PCR試劑盒
            生化檢測試劑盒
            科研細(xì)胞
            天然蛋白、重組蛋白

            腫瘤細(xì)胞增殖檢測:3H同位素滲入法實(shí)例

            時(shí)間:2018/3/22閱讀:968
            分享:

            一、原理
            腫瘤細(xì)胞在有絲分裂原PHA、ConA 等的刺激下,產(chǎn)生增殖反應(yīng),DNA和RNA合成明顯增加,如在培養(yǎng)液中加入3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),則可被轉(zhuǎn)化中的細(xì)胞攝入。測定標(biāo)記淋巴細(xì)胞的放射強(qiáng)度可反映淋巴細(xì)胞增殖的程度。
            二、儀器和材料
            RPMI-1640 細(xì)胞培養(yǎng)液、小牛血清、2-巰基乙醇(2-ME)、青霉素、鏈霉素、刀豆蛋白A(ConA)、Hank's液、PBS緩沖液(pH7.2-7.4)、3H-TdR、閃爍液[2,5-二苯基惡唑(PPO)0.5g、1,4-雙-(5-苯基惡唑基)-苯(POPOP)0.25g、二甲苯500mL混勻]
            200目篩網(wǎng),96孔培養(yǎng)板(平底),手術(shù)器械、二氧化碳培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、液體閃爍儀、多頭細(xì)胞取集器、49型玻璃纖維濾紙。
            三、實(shí)驗(yàn)步驟
            1、脾細(xì)胞懸液制備
            無菌取脾,置于盛有適量無菌Hank's液的小平皿中,用鑷子輕輕將脾撕碎,制成單細(xì)胞懸液。經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾,用Hank's液洗3次,每次離心10min(1000r/min)。然后將細(xì)胞懸浮于2mL的*培養(yǎng)液中,用臺(tái)酚蘭染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95%以上),zui后用RPMI1640*培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)成5×106個(gè)/mL。
            2、淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)
            將脾細(xì)胞懸液加入到96孔培養(yǎng)板中,200μL/孔,每一份脾細(xì)胞懸液分裝6個(gè)孔,3孔加ConA(5ug/mL),另3個(gè)孔不加ConA 作為對照。置5% CO2,37℃培養(yǎng)72h,培養(yǎng)結(jié)束前6h,每孔加入3H-TdR 20μL,使其終濃度為(3.7-18.5)×104Bq/mL。用多頭細(xì)胞收集器將細(xì)胞取集于玻璃纖維濾紙上。濾紙片充分干燥后置測量瓶中,加入7mL閃爍液,用液閃儀測定每分鐘脈沖數(shù)(cpm)。
            3、數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定
            一般采用方差分析,但腫瘤細(xì)胞需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),方差齊,計(jì)算F值,F(xiàn)值< F0.05,結(jié)論:各組均數(shù)間差異無顯著性;F值≥F0.05,P≤0.05,用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì);對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊要求后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì);若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的,改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
            以每分鐘脈沖數(shù)(cpm)表示增殖程度,用刺激指數(shù)(SI)來表示
                                       實(shí)驗(yàn)孔cpm
                               SI=  ─────────
                                             對照孔cpm
            受試樣品組的SI值顯著高于對照組的SI值,即可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
                阿巴卡韋相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品    172015-79-1    20mg
                替米沙坦相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    152628-02-9     20mg
                阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品    148146-51-4    20mg
                曲氟胸苷相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    14599-46-3     20mg
                氯吡格雷相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品    144750-52-7    20mg
                氯吡格雷相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    144750-42-5    20mg
                R-佐米曲坦異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品    139264-24-7     20mg
                三氯氨絡(luò)鉑酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品    13820-91-2     20mg
            Sennoside B     番瀉苷B標(biāo)準(zhǔn)品    128-57-4     20mg
                阿巴卡韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    124752-25-6    20mg
            腫瘤細(xì)胞

             

            會(huì)員登錄

            ×

            請輸入賬號

            請輸入密碼

            =

            請輸驗(yàn)證碼

            收藏該商鋪

            X
            該信息已收藏!
            標(biāo)簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

            常用:

            提示

            X
            您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
            撥打電話
            在線留言