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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            細(xì)胞
            elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
            PCR檢測(cè)試劑盒
            質(zhì)粒
            定量PCR試劑盒
            生化檢測(cè)試劑盒
            科研細(xì)胞
            天然蛋白、重組蛋白

            如何判斷原代細(xì)胞污染了?

            時(shí)間:2018/4/10閱讀:4075
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            狀態(tài) 1:原代細(xì)胞培養(yǎng)液變渾濁了,經(jīng)常見(jiàn)到是米湯樣,黃色液體,一般認(rèn)為細(xì)菌污染。
            狀態(tài) 2:細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)含有能動(dòng)的小黑點(diǎn),一般認(rèn)為是黑膠蟲(chóng)。
            狀態(tài) 3:胞培養(yǎng)基清亮,但是能看到飄在培養(yǎng)液帶有毛毛的白色的菌狀物質(zhì),有可能就是真菌感染。
            策略:細(xì)胞污染了就直接扔了,還得把培養(yǎng)箱用酒精棉球擦干凈,并用紫外照射半小時(shí),防止再次污染。同時(shí)建議細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),在培養(yǎng)基中加入青鏈霉素 (尤其是初學(xué)者)
            細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞周?chē)?xì)胞上有很多小黑點(diǎn),怎么辦?
            策略 1:用胰酶消化下來(lái)后,低速短時(shí)間離心,不同實(shí)驗(yàn)室不一樣,如果平時(shí)是 1 000 轉(zhuǎn) 5 min 的話(huà),就可以改為 700 轉(zhuǎn) 3 min,用新的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞收集是少一點(diǎn),但是一般都能干凈很多。多傳幾代就好多了。
            策略 2:如果多次嘗試之后還是不干凈,就懷疑是否存在支原體污染了,用抗支原體藥就 OK 了。一般用上 3~5 天,細(xì)胞就干干凈凈了。
            細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞表面沾了很多死細(xì)胞,傳代過(guò)程中一直存在怎么破?
            有一招屢試不爽,那就是用 PBS 洗兩遍之后,加胰酶進(jìn)去,晃一晃,迅速將胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死細(xì)胞由于粘附能力很弱,*次加胰酶進(jìn)去以后會(huì)掉下來(lái),第二次加胰酶下來(lái)的細(xì)胞才是活性比較強(qiáng)的原代細(xì)胞。整完一次之后,再次傳代方法同上,一般 2~3 次之后,細(xì)胞就完好如初了。
            效價(jià)測(cè)定    FSH190IU、LH242IU/支    150524-200503    人絕經(jīng)尿促性素(HMG)
            效價(jià)測(cè)定    21IU/支    050529-200902    縮宮素(合成)
            免疫測(cè)定用    600μIU    150530-0312    促甲狀腺素(TSH)
            免疫測(cè)定用    930mIU    150531-201003    促黃體生成激素(LH)
            免疫測(cè)定用    9mIU/支    150532-0004    泌乳素
            免疫測(cè)定用    450mIU/支    150533-0212    促卵泡生成素
            免疫測(cè)定用    1.22mIU/0.61ug/支    534-9604    生長(zhǎng)激素
            免疫測(cè)定用    240ng/0.5ml/支    150535-201002    人絨毛膜促性腺激素β亞單位
            原代細(xì)胞

             

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