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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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            細(xì)胞
            elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
            PCR檢測試劑盒
            質(zhì)粒
            定量PCR試劑盒
            生化檢測試劑盒
            科研細(xì)胞
            天然蛋白、重組蛋白
            抗體

            原代細(xì)胞增殖生長數(shù)值的步驟

            時間:2018/4/17閱讀:117
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            測定原代細(xì)胞增長數(shù)值常用zui簡便的方法。

            一般過程為

            1. 接種21 孔/24 孔板細(xì)胞(如用培養(yǎng)瓶時則21 瓶)。

            2. 分7 組,每組3 孔(或瓶),培養(yǎng)一周(7 天),期間逐日檢測一組,計(jì)數(shù)。

            3. 把7 天中的細(xì)胞數(shù)值繪成圖,即為細(xì)胞生長曲線。
            實(shí)驗(yàn)材料    
            細(xì)胞
            試劑、試劑盒    
            胰蛋白酶
            儀器、耗材    
            吸管
            實(shí)驗(yàn)步驟    1. 懸液制備

            取待測生長狀態(tài)良好細(xì)胞,增長至接近匯合時,向培養(yǎng)瓶內(nèi)加1 ml升0.25 %胰蛋白酶液,37 ℃溫箱中消化,至細(xì)胞接近脫離瓶壁前吸出消化液、加新的培養(yǎng)液、輕吹打制備成細(xì)懸液、計(jì)數(shù);

            2. 接種

            向每孔中接種等量細(xì)胞,置溫箱中培養(yǎng);把培養(yǎng)瓶中營養(yǎng)液倒入試管中并記錄下毫升量;

            3. 計(jì)數(shù)檢測

            從次日起,即開始檢測*組每個孔(或瓶)中的細(xì)胞總數(shù),用計(jì)算盤或用細(xì)胞自動計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù),取3 個孔的均值,如此至第7 組結(jié)束;

            4. 繪圖

            用座標(biāo)圖紙繪成生長曲線。
            收起
            注意事項(xiàng)    
            1. 計(jì)數(shù)法簡便易行,但不夠,約有20 %~30 %的誤差。為提高準(zhǔn)確性,每孔也應(yīng)計(jì)算2~3 次,則總和每組計(jì)算總次數(shù)達(dá)6 次~12 次,均值可能更為。

            2. 原代細(xì)胞數(shù)量增加1 倍的時間稱倍增時間,亦可從細(xì)胞生長曲線中測知。
            Neotame Related Compound A    15mg    紐甜相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    
            Nevirapine Anhydrous     100mg    無水奈韋拉平標(biāo)準(zhǔn)品    129618-40-2 
            Nevirapine Hemihydrate     100mg    半水奈韋拉平標(biāo)準(zhǔn)品    129618-40-2 
            N-Glycolylneuraminic Acid     200mg    N-羥乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品    1113-83-3 
            Niacin    200mg    煙酸標(biāo)準(zhǔn)品    59-67-6
            Niacinamide (Vitamin B3)    500mg    煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品    98-92-0 
            Nicotine Bitartrate Dihydrate     500mg    二水合重酒石酸尼古丁標(biāo)準(zhǔn)品    6019/6/3
            Nifedipine     125mg    硝苯地平標(biāo)準(zhǔn)品    21829-25-4 
            Nimodipine     125mg    尼莫地平標(biāo)準(zhǔn)品    66085-59-4 
            Nitazoxanide    200mg    硝唑尼特標(biāo)準(zhǔn)品    55981-09-4 
            原代細(xì)胞

             

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