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ELISA試劑盒批發(fā)操作除了掌握基本步驟外,還需要知道一些技巧性的知識(shí),以下是本公司資深技術(shù)通過(guò)多年經(jīng)驗(yàn)為大家整理的實(shí)驗(yàn)匯總:
1.包衣液的選擇,碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時(shí)因?yàn)闇y(cè)試需求,數(shù)據(jù)包緩沖溶液是一種特殊的原料可采用中性包裝。應(yīng)注意以下原則:蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合,取決于在固相的疏水性基團(tuán)和疏水性相互作用的載體表面蛋白分子的結(jié)構(gòu),物理吸附是非特異性的,蛋白分子量,等電點(diǎn),大集中,小分子蛋白蛋白質(zhì)通常含有疏水基團(tuán)越多,所以更容易吸附在固相載體表面。測(cè)試也有很強(qiáng)的理論于實(shí)踐,看zui后一個(gè)可以應(yīng)用到我們的測(cè)試。除了剛才提到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液,和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。
2.包被是非常重要的,蛋白質(zhì)濃度,原來(lái)的性質(zhì)是否降解,抗體,使你可以識(shí)別,從而節(jié)省抗原是非常重要的,我做的重組蛋白,他嚴(yán)厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質(zhì),生物素和脂類或小分子,我們的裝修之前涂,我簡(jiǎn)要如下: 2460親和素-生物素抗生物素蛋白涂層:*載體,加入生物素標(biāo)記的,這種鍍膜的方法均勻,牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原定量測(cè)定。脂質(zhì):可以在有機(jī)溶劑(如酒精)孔加入溶解后,打開(kāi)冰箱隔夜或冷干,待酒精揮發(fā),在固體表面上進(jìn)行自然干燥的固體脂質(zhì)。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯(lián)可以固定在固體載體上。
3.關(guān)閉:以下包之后是無(wú)關(guān)的蛋白質(zhì)溶液濃度高,ELISA試劑盒涂層工藝。隨函附上使大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,和干擾物質(zhì)的免疫排斥和吸附步驟。常用的密封:0。05% - 0。5%牛血清白蛋白;10%或1%明膠牛血清;脫脂奶粉,價(jià)格相對(duì)低廉,可用于高濃度(5%~10%);和一些罕見(jiàn)的使用各種動(dòng)物血清(主要是為了消除類似的蛋白和酪蛋白等干擾)。但到底選擇什么,根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體實(shí)踐。
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