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            人D二聚體ELISA檢測試劑盒操作步驟

            時間:2021/9/28閱讀:223
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            人D二聚體ELISA檢測試劑盒操作步驟:


            1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

            2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

            4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

            6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

            7. 溫育:操作同3。

            8. 洗滌:操作同5。

            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

            10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

            11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

            大鼠肝細胞;IAR20

            大鼠氣管上皮細胞;RTE

            大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E

            大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3

            大鼠骨骼肌成肌細胞;L6

            正常大鼠腎細胞;NRK

            大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1

            大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)

            大鼠骨髓瘤細胞;IR983F

            Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256

            大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1

            大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1

            大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F

            正常大鼠腎細胞;NRK

            正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F

            大鼠腎系膜細胞;RMC

            大鼠腦膠質瘤細胞;C6

            大鼠肝細胞;BRL

            正常大鼠腎細胞;NRK

            大鼠肝細胞;BRL 3A

            大鼠骨骼肌成肌細胞;L6

            大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)

            大鼠雪旺細胞;RSC96

            大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5

            正常大鼠腎細胞;NRK-52E

            大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]

            大鼠肝細胞;BRL 3A

            大鼠腦膠質瘤細胞;C6

            大鼠肝癌細胞;CBRH-7919 [CBRH7919]

            大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]

            大鼠肝癌細胞;RH-35

            大鼠乳腺癌細胞;SHZ-88

            大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細胞;AR42J

            大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-2H3

            大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化)

            大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)

            大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.3


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