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            人嗜鉻蛋白A(CgA)免疫組化試劑盒實驗步驟

            時間:2021/12/9閱讀:506
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            人嗜鉻蛋白A(CgA)免疫組化試劑盒實驗步驟:


            1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度


            2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;


            3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%乙醇2 min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min;


            4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),

            直接進(jìn)入第5 步封閉。

            5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;


            6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜;


            7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


            8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;


            9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min;


            10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


            11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;


            12.加HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37℃濕盒中孵育30 min;


            13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);


            14.顯色:應(yīng)用DAB 溶液(試劑F)顯色;


            15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;


            16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;


            17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。

            自噬相關(guān)蛋白9A抗體

            醛縮酶C抗體

            谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體

            三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體

            三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體

            ?;o酶A脫氫酶長鏈抗體

            ?;o酶A脫氫酶中鏈抗體

            酰基輔酶A脫氫酶短鏈抗體

            過氧化物酶?;o酶A氧化酶1抗體

            磷酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

            轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1)

            有絲分裂激酶A/B/C抗體

            蛋白酪氨酸激酶ATK抗體

            長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體

            過氧化物酶酰基輔酶A氧化酶2抗體

            膽固醇?;D(zhuǎn)移酶1抗體

            磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

            磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體

            磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體

            磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體

            磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

            APS抗體

            激活素受體樣激酶1抗體

            激活素A受體1B抗體

            磷酸化雄激素受體抗體


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