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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15201736385

            細(xì)胞
            elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
            PCR檢測(cè)試劑盒
            質(zhì)粒
            定量PCR試劑盒
            生化檢測(cè)試劑盒
            科研細(xì)胞
            天然蛋白、重組蛋白
            抗體

            小鼠CD19分子(CD19)Elisa試劑盒操作步驟

            時(shí)間:2022/2/17閱讀:234
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            小鼠CD19分子(CD19)Elisa試劑盒操作步驟:


            1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。


            240pg/ml


            5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品


            150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液


            120pg/ml


            4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品


            150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液


            60pg/ml


            3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品


            150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液


            30pg/ml


            2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品


            150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液


            15pg/ml


            1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品


            150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液


                2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于         酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。


            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   


            4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用


            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


            6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。


            7. 溫育:操作同3。


            8. 洗滌:操作同5。


            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.


            10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。


            11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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