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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            細(xì)胞
            elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
            PCR檢測試劑盒
            質(zhì)粒
            定量PCR試劑盒
            生化檢測試劑盒
            科研細(xì)胞
            天然蛋白、重組蛋白

            大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)elisa試劑盒操作步驟

            時(shí)間:2022/8/16閱讀:206
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            大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)elisa試劑盒操作步驟


            1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

            2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

            4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

            6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

            7. 溫育:操作同3。

            8. 洗滌:操作同5。

            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

            10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

            11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

            角質(zhì)細(xì)胞生長因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KRG2

            鉀離子通道蛋白G蛋白4抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNG4

            鉀通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCTD18

            胞質(zhì)接頭蛋白Keap1現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KEAP1

            舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KALRN

            細(xì)胞內(nèi)流鉀通道蛋白Kir4.1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Kir4.1

            腎病樣蛋白3抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KIRREL3

            KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KLF7

            Kelch樣蛋白8抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KLHL8

            鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNQ2

            鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCTD7

            鉀通道蛋白1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Kv1.1

            電壓門控鉀通道蛋白1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNAB1

            微管驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1A抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KIF1A

            鉀離子通道蛋白家族成員1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNE1

            鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNE1L


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