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            開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

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                                           開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

            概述:

            熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中,隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增,PCR產物不斷積累,熒光信號也會相應的增加,這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。
            開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒PCR實驗方法步驟:

            方法:

            1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

            10×PCR buffer                   

            5 μl     dNTP mix (2mM)             

            4 μl     引物1(10pM)                 

            2 μl     引物2(10pM)                 

            2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

            1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

            1 μl      加ddH2O至 50 μl  

            視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

            2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。

            3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

            4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

            開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒PCR注意事項:

            1.基礎程序;

            2.擴增溫度和延伸溫度;

            3.反應時間;

            4.循環(huán)次數(shù);

            5.PCR 反應液的配制;

            6.PCR技術的基本原理;

            7.PCR的反應動力學;

            8.PCR擴增產物;

            9.PCR反應體系與反應條件。點擊了解更公司產品。
            熒光定量PCR服務:

            簡介:實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒PCR主要定量PCR儀器。

            1、熒光定量PCR服務要求:

            (01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。

            (02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

            (03)請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等

            2、熒光定量PCR操作程序

            (01)引物(探針)設計與合成。

            (02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。

            (03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。

            (04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。

            3、熒光定量PCR的收費標準:

              我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。

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