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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            DR4 MEF使用原理

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            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-13 09:25:50瀏覽次數(shù):418次

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            DR4 MEF使用原理操作步驟:
            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
            資源名稱 DR4 MEF使用原理
            種屬  DR4小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,經(jīng)射線處理,P3,300萬細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏)

            類型  取孕12.5天的DR4小鼠的胚胎制備后經(jīng)過射線處理

            形態(tài)  成纖維細(xì)胞

            培養(yǎng)方法

            培養(yǎng)基  MEF細(xì)胞*培養(yǎng)基(100 ml): DMEM (Invitrogen, 12430) 88 ml FBS (Biochrom, S4115) 10 ml Glutamax (Invitrogen, 35050) 1 ml Non-essential Amino Acids, 100× (Invitrogen, 11140) 1 ml 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。

            詳細(xì)說明

            動(dòng)物種別  小鼠,DR4轉(zhuǎn)基因小鼠

            描述  經(jīng)射線處理的P3代飼養(yǎng)層細(xì)胞,每支細(xì)胞量3×106,具有四種抗性。經(jīng)測試可以耐受藥物濃度如下:G418 (neomycin): 200 μg/ml; Puromycin: 0.4 μg/ml; Hygromycin: 110 μg/ml; 6-Thioguanine: 2.5 μg/ml。

            冷凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長期儲(chǔ)存。
            冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。

            DR4 MEF使用原理注意事項(xiàng):
            1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
            2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
            3. 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
            4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
            5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
            6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
            FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

            CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

            人牙齦成纖維細(xì)胞cDNAHGF cDNA

            豬胚胎傳代細(xì)胞;ST 頸癌細(xì)胞,SiHa細(xì)胞 B22細(xì)胞,KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株

            Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A

            HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

            CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

            FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

            人牙齦成纖維細(xì)胞cDNAHGF cDNA

            豬胚胎傳代細(xì)胞;ST 頸癌細(xì)胞,SiHa細(xì)胞 B22細(xì)胞,KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株

            Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A

            HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

            DCN Others Human 人 Decorin / DCN / SLRR1B 人細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

            腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

            IL18RAP Others Mouse 小鼠 IL18RAP / IL1R7 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 (陽性對照) (變性)

            中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 細(xì)胞,C127細(xì)胞 J774A.1細(xì)胞,鼠腹水單核細(xì)胞瘤

            人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]

            小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4

            人腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

            人小腦顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

            人晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

            人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

            大鼠三葉因子2(TFF2)ELISA試劑盒 ,英文名: TFF2 ELISA Kit

            Mouse signal transduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒

            Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

            CLIAKitforHAase(HumanHyaluronidase)ELISAKit人透明質(zhì)酸酶規(guī)格:48T/96T

            細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒20次

            RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            小鼠維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒MouseVitaminC,VCELISAKit 96T/48T

            人抗麥膠蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒 Human anti-gliadin antibody IgG ELISA Kit

            RabbitInterleukin1,IL-1ELISAKit兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            細(xì)胞TNFBETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒10/50次

            Humantumournecrosisfactorrelatedweakinducerofapoptosis,TWEAKELISA試劑盒人壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            人雄激素受體(AR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

            豬前列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫試劑盒 Pig prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2 ELISA kit

            HumanEndostatin,ESELISAKit 人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

            HumanMatrixmetalloproteinase13,MMP-13ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            組織樣品組織蛋白酶G(CATHEPSING)活性比色法定量檢測試劑盒20次

            Humanheartfattyacidbindingprotein,h-FABPELISAKit人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            DR4 MEF使用原理人血漿抗凝蛋白Celisa試劑盒   人血漿抗凝蛋白C試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   人血漿抗凝蛋白C試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人血漿抗凝蛋白C試劑盒、人血漿抗凝蛋白C elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

            人血漿α顆粒膜蛋白elisa試劑盒   人血漿α顆粒膜蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   人血漿α顆粒膜蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人血漿α顆粒膜蛋白試劑盒、人血漿α顆粒膜蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

            人血紅素氧化酶1elisa試劑盒   人血紅素氧化酶1試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   人血紅素氧化酶1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人血紅素氧化酶1試劑盒、人血紅素氧化酶1 elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

            人血紅素氧合酶2elisa試劑盒   人血紅素氧合酶2試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   人血紅素氧合酶2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人血紅素氧合酶2試劑盒、人血紅素氧合酶2 elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

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