產(chǎn)品名稱：大鼠牙乳頭細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10234

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Nebulin/FITC 熒光素標記伴肌動蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 VEGF/RBITC 羅丹明標記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

血管緊張素Ⅱ受體抗體  Angiotensin II receptor 0.2ml

Mouse  human IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗人IgG 0.1ml

gamma C Crystallin 英文名稱： 晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內(nèi)障相關蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRODH 脯脫氫酶抗體 規(guī)格 0.2ml

 VEGF/RBITC 羅丹明標記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Emap-2 大鼠內(nèi)皮單核細胞活化多肽2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃熱病毒包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MURF3 肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人一氧化碳血紅蛋白 96T

Salmonella enteritidis 英文名稱： 腸炎沙門氏菌抗體 0.2ml

CARD7 英文名稱： 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.1ml

 envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃熱病毒包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  rabbit IgG/PE PE標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

Galactocerebroside 英文名稱： 半乳糖腦苷脂酶抗體 0.1ml

血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體  ACEI 0.1ml

 mucin4/Muc4/FITC 熒光素標記粘蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRRSV-GP5 豬藍耳病病毒GP5蛋白抗體 規(guī)格 1ml

 ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠牙乳頭細胞*培養(yǎng)基細胞花生烯酸（arachidonic acid）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次胰島素（豬）

組織花生烯酸（arachidonic acid）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次甲萘醌

白三烯A4（Leukotriene A4 ；LTA4）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次哈西奈德

白三烯B4（LTB4）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次鹽酸羥甲唑啉

白三烯C4（LTC4）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次順式那

白三烯D4（LTD4）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次大鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)Elisa測定試劑盒

白三烯E4（LTE4）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次半胱酸蛋白酶-10抗體流式組化

5-羥基二十烯酸（5-HETE）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體流式組化

12-羥基二十烯酸（12-HETE）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次FOSL2抗體流式組化

15-羥基二十烯酸（15-HETE）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次糖皮質(zhì)素誘導腫瘤壞死因子受體抗體流式組化

前列腺素H2（PGH2）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次果膠酶Y-23

前列腺素E2（PGE2）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次鹽酸萬古霉素

6-KETO-PGF1a高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次3-吲哚丙酸鉀

前列腺素F2a（PGF2a）高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次脫氧核糖核酸（鯡魚精）

8-ISO-PGF2a糖原Ⅸ

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。