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            上海研生實業(yè)有限公司
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            鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號50T

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2020-09-30 10:02:18瀏覽次數(shù):306次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
            分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            貨號 YSP7085 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
            鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。

            參數(shù)規(guī)格:
            產(chǎn)品名稱:鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
            英文名稱:Pleisiomonas spp.
            產(chǎn)品規(guī)格:50T
            產(chǎn)品運輸:低溫運輸
            產(chǎn)品保存:-20℃保存
            產(chǎn)品有效期:一年
            產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
            運輸及保存
            低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
            自備試劑
            DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
            產(chǎn)品及特點:
            1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
            2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
            3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
            4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
            5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
            本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

            ?
            實驗過程:
            一、鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
            1. DNA模板
            2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
            3.10×PCR Buffer
            4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
            5.Taq酶
            二、操作步驟
            1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
                  10×PCR buffer             5μl
                  dNTP mixl                 4μl
                  引物1(10pM)               2μl
                  引物2(10PM)              2μl
                  Taq酶(2U/μl)            1μl
                  DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
                 加ddH2O至               50 μl
                 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
            2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
            3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
            4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
            使用方法:
            一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
            1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
            2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
            3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
            4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
            二、樣品DNA的制備
            8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
            9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
            三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
            10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
            11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
            以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
            98%500g250mg五味子3691358Macrophage Inflammatory Protein 2

            對 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg AKT相互作用蛋白蛋白抗體 PDE4D ELISA Kit 二酯酶4D(PDE4D)ELISA試劑盒

            Crocin II阿托伐他汀鈣標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人血清白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 0.2ml

            BetaLPH(Human Betalipotropic hormone) ELISA Kit  人β促脂素CAS號:10043353淀粉合成酶檢測試盒100mgHuman/人Elisa試盒31252423

            98%,含銅屑穩(wěn)定劑25g1g龍膽黃5836293Macrophage Inflammatory Protein1α

            蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rutin

            Morin阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人α-2巨球蛋白(Alpha-2-M)ELISA試劑盒 0.2ml

            LTA(Human lipoteichoic acids) ELISA Kit  人脂壁CAS號:100414景天庚糖二酶檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒312753063

            97%25g5g脂肪酶(假絲酵母)estriol

            敵稗標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/ml Propanil solution

            DRADA/ADAR1(Doublestranded RNAspecific adenosine deaminase)N terminal  雙鏈RNA腺苷脫氨基酶抗原(N端)進口、原裝聚(ADP核糖)聚合酶1檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4975739

            98%100g25g脂肪酶(假絲酵母)Thyroglobulin IgG antibody

             人真皮微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

            DRADA/ADAR1(Doublestranded RNAspecific adenosine deaminase)  雙鏈RNA腺苷脫氨基酶抗原現(xiàn)貨供應(yīng)鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒4975739

            98%5g1g脂肪酶(假絲酵母)pepsinogen

            (0.105mg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:0.105mg/ml Phenthoate solution

            AEG1 peptide  AEG1抗原*5羥色胺受體1A檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒49761822
            鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒常春藤皂苷元 CAS號: 465996 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            D松 CAS號: 10284636 規(guī)格: ≥95;20mg 訂購|咨詢

            可可堿 CAS號: 83670 規(guī)格: ≥99%;20mg 訂購|咨詢

            10羥喜樹堿 CAS號: 67656308;64439812 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            鷹嘴豆芽素A CAS號: 491805 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            荷葉堿 CAS號: 475832 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            橙黃決明素 CAS號: 67979253 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            光甘草定 CAS號: 59870687 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            鹽石蒜堿 CAS號: 2188683 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            9氧喜樹堿 CAS號: 19685100 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            2”O沒食子酰金絲桃苷 CAS號: 53209271 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            大薊苷 CAS號: 28978021 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            地膚子皂苷Ic CAS號: 96990180 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            菊苣 CAS號: 6537800 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            3異倒捻子素 CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

             

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