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            上海研生實業(yè)有限公司
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            卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號50T

            品       牌其他品牌

            廠商性質經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2020-09-30 10:01:57瀏覽次數(shù):320次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
            分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            貨號 YSP7087 應用領域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
            卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

            實驗過程:
            一、卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
            1. DNA模板
            2.產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
            3.10×PCR Buffer
            4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
            5.Taq酶
            二、操作步驟
            1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
                  10×PCR buffer             5μl
                  dNTP mixl                 4μl
                  引物1(10pM)               2μl
                  引物2(10PM)              2μl
                  Taq酶(2U/μl)            1μl
                  DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
                 加ddH2O至               50 μl
                 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
            2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
            3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
            4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
            參數(shù)規(guī)格:
            產(chǎn)品名稱:卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
            英文名稱:Pneumocystis carinii
            產(chǎn)品規(guī)格:50T
            產(chǎn)品運輸:低溫運輸
            產(chǎn)品保存:-20℃保存
            產(chǎn)品有效期:一年
            產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
            運輸及保存
            低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
            自備試劑
            DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
            本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

            ?
            產(chǎn)品及特點:
            1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
            2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
            3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
            4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
            5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
            以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
            98%25g25g12羥基異補骨脂酚126801589Macrophage ColonyStimulating Factor

             小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL

            phloridzin阿托伐他汀相關物質D標準品規(guī)格:規(guī)格:人α1微球蛋白/bikunin蛋白前體(AMBP)ELISA試劑盒 0.2ml

            人CCL26KRIT1  腦海綿狀血管畸形蛋白1抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:200mgTARDNA結合蛋白43檢測試盒20mg人乳腺癌細胞,HS578T細胞1x10^6cells

            Punicalagin胰島素自身抗體檢測試劑盒20mg

            氧化苦參堿 質量規(guī)格:≥98%,BR Oxymatrine

            胰島素樣生長因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白*250(g)

            人CCL3HPV16 L2  人乳頭瘤病16型L2抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:200mgTau蛋白檢測試盒20mg人乳腺癌細胞,MCF7細胞1x10^6cells

            99%25g1g脂肪酶(豬胰)very low density lipoprotein cholesterol

            克螨特標準溶液(1.00mg/ml) 質量規(guī)格:1.00mg/ml Propargite solution

            Tween80 Medium(Fungi)油的真菌無菌試驗絲氨肽酶抑制子Kazal型1檢測試盒20mg膠原酶I檢測試盒Cytokeratin16

            四基羅丹明6馬來酰亞(單一化合物)5mg

             Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)

            Fungi Agar生物制品真菌無菌檢驗氧化應激反應誘導凋亡蛋白檢測試盒20mg角蛋白16檢測試盒connectivetissuegrowthfactor

            四基羅丹明5馬來酰亞(單一化合物)5mg

            三殺蟲酯標準溶液(10μg/ml,u=2%) 質量規(guī)格:10μg/ml,u=2% Plifenat solution

            Rose Bengal Agar生物制品真菌、酵母菌計數(shù)唾液淀粉酶檢測試盒20mg結締組織生長子檢測試盒Haptoglobin
            卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒獐牙菜苷 CAS號: 14215862 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            烏金苷 CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            重樓皂苷VII CAS號: 76296758 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            重樓皂苷VI CAS號: 55916513 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            鼠尾草 CAS號: 5957802 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            重樓皂苷II CAS號: 76296725 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            重樓皂苷I CAS號: 50773416 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            小白菊內 CAS號: 20554841 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            瑞香素 CAS號: 486351 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            葫蘆巴堿鹽鹽 CAS號: 6138416 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            槐角堿 CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            香紫蘇 CAS號: 515037 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            羥紅花黃色素A CAS號: 78281024 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            斷血流皂苷A CAS號: 916347314 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

            大葉茜草素 CAS號: 55481884 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
            使用方法:
            一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
            1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
            2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
            3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
            4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
            7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
            二、樣品DNA的制備
            8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
            9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
            三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
            10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
            11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

             

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