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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>定量PCR試劑盒>>探針法熒光定量PCR試劑盒>> 50T消化鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2020-09-30 09:45:55瀏覽次數(shù):302次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號 | YSP7071 | 應用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:消化鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Peptostreptococcus spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。?
實驗過程:
一、消化鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設(shè)置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Schisandrin酰膽受體抗體檢測試劑盒20mg
5'-O-(4,4'-二基三基甲基)-胸苷-3'-O-丁二 質(zhì)量規(guī)格:BR,* 5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid
促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 NMNAT2 / NMNAT-2 蛋白 (His 標簽)*250(g)
Human Protein S ELISA Kit 人蛋白SCAS號:101666686β淀粉酶檢測試盒500mgHuman/人Elisa試盒31126951
Schizandrin B酰膽酶檢測試劑盒10mg
RTE(大鼠氣管上皮細胞)5×106cells/瓶×2
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組 Human Serum Albumin / HSA / ALB 蛋白*250(g)
人ESelectin ELISA kit TET1/CXXC6 Teneleven轉(zhuǎn)運基1蛋白抗體規(guī)格:96T/48TAspartic Acid規(guī)格:500mgR脊椎蛋白2檢測試盒20mg人胚細胞,AD293細胞1x10^6cells
7羥基吩惡嗪5mg
1,3-二基-1,3-二(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 1,3-Diphenyl-1,3-propanedione 宇佐曲霉 Aspergillus usamii胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)
MiddleBrook 7H10 Agar分枝桿菌的分離培養(yǎng)日本腦炎病IgG抗體檢測試盒20mg環(huán)腺苷檢測試盒cyclooxygenase2
派洛寧Y 5mg
馬 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg 化自噬相關(guān)蛋白16A抗體 MAPK ELISA Kit 絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)ELISA試劑盒
MiddleBrook 7H11 Agar分枝桿菌的分離培養(yǎng)麥角蛋白IgA抗體檢測試盒20mg環(huán)氧合酶2檢測試盒bradykinin
派洛寧Y 5mg
硫辛 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 人Nesfatin1蛋白(Nesfatin-1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠粒細胞集落激因子(G-CSF)ELISA試劑盒,英文名:G-CSF ELISA Kit
Aeromonas Differential Agar分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌血小板子4檢測試盒20mg緩激肽檢測試盒XanthineOxidase
消化鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒丹D CAS號: 142998478 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
丹C CAS號: 115841093 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
遠志山III CAS號: 162857785 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
澳洲茄邊堿 CAS號: 20311517 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
澳洲茄堿 CAS號: 19121585 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鹽小檗 CAS號: 6078177 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
黃連堿 CAS號: 1198398718 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
原兒茶 CAS號: 99503 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
原兒茶醛 CAS號: 139855 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
D四藥根堿 CAS號: 13063542 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
原阿堿 CAS號: 130869 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
去芹菜糖桔梗皂苷D CAS號: 規(guī)格: HPLC≥90%;10mg 訂購|咨詢
()香樹脂4OβD喃 CAS號: 136997643 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
碘木蘭花堿 CAS號: CAS:2141095 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
鹽黃柏堿 CAS號: 104112825 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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