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            上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15201736385

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            派琴蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)50T

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2020-09-30 09:50:22瀏覽次數(shù):355次

            聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)
            CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
            分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            貨號(hào) YSP7074 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
            派琴蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

            【產(chǎn)品名稱】派琴蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
            【英文名稱】Perkinsus
            【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7074
            【包裝規(guī)格】50T
            【預(yù)期用途】
            產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
            【檢驗(yàn)原理】
            本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
            *的擴(kuò)增性能:
            高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
            ?
            PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
            派琴蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
            1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
            10×PCR buffer                   

            5 μl     dNTP mix (2mM)             
            4 μl     引物1(10pM)                 
            2 μl     引物2(10pM)                 
            2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
            1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
            1 μl      加ddH2O至 50 μl  
            視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
            2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
            3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
            4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
            PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

            循環(huán)步驟

            溫度

            時(shí)間

            循環(huán)數(shù)

            預(yù)變性

            94℃

            5   min

            1

            變性

            94℃

            10   sec

            30-40

            退火

            50-65℃

            20   sec

            30-40

            延伸

            72℃

            30   sec/kb

            30-40

            終延伸

            72℃

            5   min

            1

            實(shí)驗(yàn)步驟:
            典型的PCR由
            (1)高溫變性模板;
            (2)引物與模板退火;
            (3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
            將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
            人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
            耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
            99%1g5ml新環(huán)桑色141112290growth differentiation factor 15

            厚樸酚 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR Magnolol

            Tectorigenin維生素C棕櫚酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人ALK酪氨激酶受體ELISA試劑盒 0.2ml

            C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白εCAS號(hào):10161338 中性轉(zhuǎn)化酶檢測(cè)試盒500mgHuman/人Elisa試盒3115682

            99%500g25ml4'羥基5,6脫醉椒素99105778Sulfhydryl oxidase 1

             小鼠肝細(xì)胞英文名稱:Hepa 1-6

            Tectoridin醉茄粉末提取物標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒 0.2ml

            C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δCAS號(hào):101268 二醛酶1檢測(cè)試盒100mgHuman/人Elisa試盒3115682

            1M in THF50g5g胃蛋白酶(豬胃粘膜)Recombinant Multimerin 1

             UACC-812(人腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

            Bromcersol Purple Broth Base微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),無(wú)菌加入各種糖醇類物質(zhì)抗雌激素受體β抗體檢測(cè)試盒20mg活性氧簇檢測(cè)試盒TroponinⅠ

            99%10g25g胃蛋白酶(豬胃粘膜)αSynuclein

            毒莠定(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%  Picloram

            Thioglycollate Medium用于培養(yǎng)需氧菌、微需氧菌和厭氧菌銅鋅超氧化物歧化酶檢測(cè)試盒20mg肌鈣蛋白I檢測(cè)試盒Creatinine

            99%5g100g胃蛋白酶(豬胃粘膜)interleukin2 receptor alpha

             NCI-H1975(人肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

            ASS Agar用于磺胺類靈敏度試驗(yàn)(WHO方法)富組氨糖蛋白檢測(cè)試盒20mg肌酐檢測(cè)試盒CreatineKinase
            派琴蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒茯苓 CAS號(hào): 29070926 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購(gòu)|咨詢

            氧芍藥苷 CAS號(hào): 39011911 規(guī)格: BR,99%,有;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            新穿心蓮內(nèi) CAS號(hào): 27215141 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            蓮心堿 CAS號(hào): 2292162 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            酞 CAS號(hào): 551086 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            桑皮苷C CAS號(hào): 102841430 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            桑皮苷A CAS號(hào): 102841429 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            桑辛素 CAS號(hào): 62596296 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            丹參B CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            原薯蕷皂苷 CAS號(hào): 54522520 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            橙皮苷 CAS號(hào): 11013971 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            木蘭花堿 CAS號(hào): 6681181 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            芳樟 CAS號(hào): 78706 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            蓮心堿 CAS號(hào): 2586961 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

            蓮心堿高氯鹽 CAS號(hào): 5088904 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
            熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
            (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
            (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
            產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
            其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
            其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

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